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小托马斯·弗朗西斯(Thomas Francis, Jr.,1900—1969)是第一个分离流感病毒的美国人。1941年,他受邀加入新成立的密歇根大学公共卫生学院。同年,乔纳斯·爱德华·索尔克(Jonas Edward Salk,1914—1995)来到这里,在弗朗西斯的指导下进行病毒研究的博士后工作。索尔克毕业后留校工作,从事病毒(包括流感病毒等)研究工作。他与弗朗西斯一起完善了一种流感疫苗并大规模用于军队。
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1947年,索尔克成为匹兹堡大学病毒研究实验室主任。1948年,他得到国家小儿麻痹症基金会的资助,开始了脊髓灰质炎疫苗的研究工作。他收集了125个病毒样本,并进行分类。他发现脊髓灰质炎病毒可以分为3个不同的分型,若要有效预防病毒感染,相应的疫苗要能够对3种病毒株都有效。
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因为采用了恩德斯等人的组织培养方法,索尔克加快了他的研究进度。他使用摩根的甲醛灭活法,并尽可能保持病毒的完整性以激发接种后人体的免疫反应[14]。1952年7月,索尔克在43名已经从脊髓灰质炎病毒感染中恢复来的儿童身上试验疫苗。他发现接种后,儿童血清中都出现了抗体的升高。于是他开始在志愿者身上试验疫苗,包括他自己、他妻子和他的孩子。志愿者全部获得了免疫力,并且没有感染。
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1953年,索尔克在美国医学学会杂志发表了自己的成果[15],他还在一次会议上宣称“如疫苗出现问题,自己负全部责任”。为了推广疫苗,索尔克没有申请相关的专利保护。他的积极宣传赢得了广泛的信任。
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加拿大多伦多大学下属康诺特医学研究实验室(Connaught Medical Research Laboratories)的三位学者约瑟夫·F.摩根(Joseph F. Morgan,1918—1976)、海伦J.莫顿(Helen J.Morton)和雷蒙德·C.帕克(Raymond C. Parker,1903—1974)开发出了“Medium 199”这一纯化学合成的培养基,包含60多种营养成分,用以研究细胞营养和癌症。阿瑟·E.富兰克林(Arthur E. Franklin)发现它对猴肾细胞培养的脊髓灰质炎病毒有很好的作用。莱昂内·N.法雷尔(Leone N. Farrell)进一步把培养瓶放在摇床上,成为病毒培养的“多伦多方法”。
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这一培养基给了美国国家小儿麻痹症基金会(NFIP)信心,使其于1953年下决心资助索尔克疫苗的临床研究。
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1954年4月,在NFIP、礼来公司、康诺特(Connaught)实验室和帕克戴维斯(Parke-Davis)公司等单位的通力合作下,一个全国性的疫苗人群试验展开了。虽然一个药企生产的疫苗因为混入了未灭活的病毒株而引起了200人的感染,并有11人死亡。但组织者立即采取措施,对疫苗的生产进行了标准化,从而保证了试验的质量。
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索尔克的老师弗朗西斯担任了临床试验的领导者,这次大规模的临床试验预计花费超过了1700万美元,志愿者包括美国、加拿大等地的180万人。而康诺特实验室前后生产了3000升的“Medium 199”培养基。
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最终的结果是令人振奋的,60%~70%的受试者获得了免疫力。1955年4月12日,弗朗西斯面对广播和电视宣布试验取得成功,随之疫苗获得FDA批准,当年就有400万人接种。脊髓灰质炎病毒感染者迅速从当年的28 985人降低到1957年的5894人。到1959年,有90多个国家采用了索尔克的疫苗。
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疫苗研究成功后,索尔克成为民众心目中的英雄。但他的疫苗是在其他研究者的工作上才成功的,索尔克却没有提及其他人的工作,这使许多人对索尔克不满。这也是恩德斯决心自己研发麻疹疫苗的原因之一。
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萨宾(Sabin)口服疫苗
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1954年阿尔伯特·布鲁斯·萨宾(Albert Bruce Sabin,1906—1993)在国家小儿麻痹症基金会的支持下,开始在人体试验自己的减毒活疫苗。这种活疫苗可以在肠道内大量复制,产生抗体,但不会影响神经系统。
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索尔克的灭活病毒疫苗上市后,萨宾仍坚持认为自己的口服疫苗更有效,甚至为此引发了更多的矛盾,甚至与国家小儿麻痹症基金会闹翻。1958年,萨宾与苏联科学家合作,在苏联及东欧一些国家展开口服疫苗的临床试验并获得了成功。
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1960年,美国及加拿大也开始了口服活疫苗的人群试验,但在1962年,因为各种分歧,未能批准。到1982年,在信服的临床资料面前,索尔克本人也称萨宾口服活疫苗非常有效,可以在发展中国家推广。这时美国才批准口服活疫苗上市。
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疫苗发现者未获诺贝尔奖
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1955年和1956年,索尔克都被提名诺贝尔奖,但因临床效果未确证而推迟。20世纪60年代,索尔克和萨宾以及疫苗研究过程中的合作者也被提名诺贝尔奖,不过,诺贝尔奖评审委员会讨论认为,他们的工作只是利用了别人的科学发现和发明,技术上也没有突出的创新,因此不予考虑。
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1998年10月20日,FDA推荐儿童仅使用索尔克注射疫苗,不允许口服疫苗的使用。因为美国现在的脊髓灰质炎疾病多是由变异的口服活疫苗引起的。
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病毒发现者亲自主导疫苗开发:麻疹疫苗的发现
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对于麻疹(measles)的最初科学描述见于波斯医师拉齐斯(Rhazes,860—932)出版的著作《天花与麻疹》,从而将二者区分开。欧洲殖民者将本病引入美洲,给当地土著居民带来了极大灾难。1529年,麻疹使古巴近三分之二的人口死亡。两年后,洪都拉斯一半人口因本病死亡。在19世纪,五分之一的夏威夷人,三分之一的斐济人,几乎全部的安达曼群岛居民死于麻疹。
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1954年,约翰·富兰克林·恩德斯(John Franklin Enders)和托马斯·查默斯·皮布尔斯(Thomas Chalmers Peebles,1921—2010)在一个11岁的小男孩大卫·埃德蒙斯通(David Edmonston)身上分离出一株麻疹病毒,并在鸡胚上接种成功。因为在脊髓灰质炎疫苗开发上与索尔克(Salk)产生不快,所以恩德斯决定自己主导麻疹疫苗的开发。
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一生开发了40余种疫苗的美国默克药业的疫苗专家莫里斯·拉尔夫·希勒曼(Maurice Ralph Hilleman,1919—2005)研制了减毒活疫苗的大规模生产工艺。1960年10月,恩德斯等人开始在美国和尼日利亚开展数千人的临床试验,并于1961年取得了成功[16]。疫苗于1963年上市。
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随后,辉瑞公司又推出了一个灭活疫苗。麻疹疫苗的上市,每年挽救了百万计的生命。
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因为病毒变异,麻疹近来又有流行的征兆。2007年,在日本发现麻疹患者,当局被迫封闭了几个大学防止流行。以色列也在当年诊断出多达1000余病例。
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从毒气到化疗药物,生化战争的副产品:氮芥的发现
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