1700635543
HDV是一种缺陷RNA病毒,颗粒呈球形,直径为35~37nm,其外壳是嗜肝DNA病毒表面抗原(在人类为HBsAg),内部含有丁型肝炎抗原(HDAg)。该病毒必须有HBV或其他嗜肝DNA病毒的辅助才能复制、表达抗原及引起肝损害。
1700635544
1700635545
HDV基因组为一环状单负股RNA, 全长为1679bp。在HDV感染的肝细胞中还存在着与HDV基因组互补的RNA复制中间体,称为抗—基因组(antigenome),为环状正股RNA, 该RNA也可折叠成双股杆状结构。HDV基因组和抗基因组股上均有开放读码框架(ORF),但只有抗—基因组RNA的ORF5能编码HDAg。
1700635546
1700635547
HDAg为分子量68kD的蛋白质,包括分子量为27kD和29kD的2种蛋白成分,分别称为HDAg-P24和HDAg-P29,均能与其相应的抗-HD发生特异性反应,但在血清中测不出游离的HDAg。只有用去垢剂NP-40处理除去HDV颗粒的外壳后才能检出。
1700635548
1700635549
HDV-RNA的环状基因组RNA以滚环机制(rolling circle mechanism)进行拷贝。先以基因组为模板,在RNA指导下的RNA多聚酶作用下重复抗基因组分子链,这些分子链被核酶(ribozyme)裂解后形成许多独立的等长正股RNA分子,而后再环化成许多环状抗—基因组RNA, 再以每个环状抗—基因组RNA为模板,在RNA多聚酶的作用下产生重复基因组分子链,这些分子链被核酶裂解后形成许多独立的等长负股RNA分子,而后再环化成许多新的环状基因组RNA。HDV是一种缺陷病毒,其复制需要HBV等嗜肝DNA病毒的辅助。现已证明,嗜肝DNA病毒家族中,除HBV外,土拨鼠肝炎病毒(WHV)及鸭乙型肝炎病毒(DHBV),也能为HDV提供外壳蛋白支持HDV感染。
1700635550
1700635551
HDV仅一个血清型,但可分为3个基因型,据报道Ⅰ型主要分布于美国、欧洲和中国,Ⅱ型分布于日本,Ⅲ型见于南美洲。
1700635552
1700635553
5.戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)
1700635554
1700635555
HEV最早是由苏联学者Balayan等于1983年用免疫电镜技术(IEM)从一名经口感染的志愿者粪便中检测到的直径为27~30nm病毒颗粒。1989年Reyes等应用分子克隆技术获得本病毒的基因克隆,并正式将此型肝炎及其相关病毒分别命名为戊型肝炎(hepatitis E)和戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)。它是继HCV后又一以反向遗传学方法克隆获得的肝炎病毒(图9-4)。
1700635556
1700635557
1700635558
1700635559
1700635560
图9-4 HEV克隆、鉴定流程
1700635561
1700635562
HEV为直径27~34nm圆球状颗粒,无包膜,表面有锯齿状刻缺和突起,类似嵌杯病毒。但也有报道表面无突起,具有羽毛样轮廓,呈20面对称体。
1700635563
1700635564
(1)基因组 见图9-5所示。HEV基因组为单股正链RNA, 全长7.2~7.6kb,编码2400~2533个氨基酸,由5’端非结构区(NS)和3’端结构区(S)组成,5’端和3’端各有一非编码区(NC),5’端NC区长28bp;3’端NC区长68bp。此外,3’端有一个150~300个腺苷酸残基组成的多腺苷(A)尾巴。HEV基因组由3个开放读码框架(ORFs)组成。ORF1位于NS区第28~5107个核苷酸之间,由5079bp组成,编码螺旋酶(helicase)(2950~2973bp)、RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase, RDRP)(4674~4683bp),两者均与病毒复制有关;其中第2011~2325核苷酸为相对高变区(hypervariable region, HR)。ORF1的抗原表位主要集中在RDRP区。ORF2位于S区第5147~7127个核苷酸,编码HEV结构蛋白,抗原表位数量多,且结构复杂。ORF3位于S区的ORF1和 ORF2之间,由369bp组成,编码123个氨基酸。ORF3的起始端含Met密码子,可独立编码多肽,其中至少有4个抗原表位,可能为型特异性抗原表位。
1700635565
1700635566
1700635567
1700635568
1700635569
图9-5 HEV基因组结构(Suzanne U. Emerson and Robert H. Purcell, 2003)
1700635570
1700635571
(2)基因型 目前认为HEV至少有7个基因型,即缅甸株(1型),墨西哥株(2型),美国株和猪HEV(3型),新近从中国台湾和辽宁分离的中国株(4型),意大利株(5型),希腊-1株(6型),希腊-2株(7型),从中国台湾和广州分离的毒株可归为4型或8型。我国的大多数HEV分离株与缅甸株为同一基因型。
1700635572
1700635573
HEV可在人胚肺二倍体细胞(2BS)和FRh K4细胞体外培养,用HEV cDNA探针斑点杂交法和免疫荧光法检测细胞培养物为HEV RNA和HEV抗原阳性;用培养细胞的提取液感染猕猴也获成功。用感染HEV的食蟹猴肝细胞体外培养,可见HEV在肝细胞内复制。但目前HEV尚不能大量体外细胞培养。
1700635574
1700635575
除已知人类感染HEV外,近年来发现凡>3周龄猪100%都可检测到抗-HEV抗体、HEV RNA等血清标志物,现已明确全球猪都存在HEV感染,其意义尚不明确,提示HEV有潜在的动物源性传播,是HEV感染又一个储存宿主,可能与人类感染有关。关于HEV疫苗的研究与评价,目前正处于研究当中的疫苗有NIH杆状病毒表达的疫苗,另还有NIH日本株状病毒表达的病毒样颗粒(VLPs)口服疫苗,但疗效还不确切。
1700635576
1700635577
6.庚型肝炎病毒(hepatitis G virus/GBV-C)
1700635578
1700635579
1995年,Simons等发现庚型肝炎病毒(hepatitis G virus, HGV),最初曾认为该病毒是非甲—非戊型肝炎病原。但是,近年来的多数研究表明,HGV可能不致病,它不是严格意义上的肝炎病毒的一种。
1700635580
1700635581
HGV/GBV-C和HCV同属黄病毒科,为单正链RNA病毒,其基因组全长9.1~9.4kb, 有一个连续的开放读码框架,编码一个长度约2870~2900个氨基酸的多聚前体蛋白。5’端和3’端均有一个较短的非编码区(UTR)。多聚前体蛋白的氨基端为结构区,羧基端为非结构区。结构区分为衣膜1(E1)和E2。与丙型肝炎病毒(HCV)不同之处是无核心区或核心区较短,仅编码79个氨基酸。非结构区分为NS2、NS3、NS4 A/B、NS5 A/B等区,分别编码蛋白酶、解旋酶和RNA依赖的RNA聚合酶(图9-6)。
1700635582
1700635583
至今尚未观察到HGV的病毒颗粒。
1700635584
1700635585
1700635586
1700635587
1700635588
图9-6 HGV/GBC-C基因组结构(Simmonds, 2003)
1700635589
1700635590
7.TTV(transfusion transmitted virus)
1700635591
1700635592
(1)病毒学特征 TTV系无包膜的小型病毒,病毒颗粒大小约30~50nm,核壳内含有单链环状DNA, 基因组长度约3.9kb。病毒分类尚未定。
[
上一页 ]
[ :1.700635543e+09 ]
[
下一页 ]