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[应用评价]标本要求:无菌采集;为提高血培养检出率,特别要求规范化操作(从采血时机、采血部位、采集血培养瓶数、采血量到送检时间和温度均须严格)。一旦血培养阳性,则在取样涂片、染色、镜检的同时,转种培养基进行分离培养,做直接抗菌药物敏感性试验;并鉴定细菌种属(必要时再分型)与抗菌药物体外敏感性试验。
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阳性:结果报告分为3级:①一级:一旦血培养仪报警阳性,即从阳性瓶取样进行涂片、革兰染色、镜检,并报告临床医生(血培养阳性以危急结果报告);②二级:报告直接抗菌药物敏感性试验结果;③三级:报告细菌种属、药物敏感性试验、结果评价与临床建议。
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血培养阳性须排除污染菌:皮肤消毒、静脉穿刺过程中无菌操作是避免污染的重要环节。有时很难区分血培养阳性菌是真致病菌或是污染菌,如怀疑为污染菌,则报告为:“该菌株可能为采样时皮肤污染微生物,如需进一步检测,请与微生物科联系”。常见的污染菌:凝固酶阴性葡萄球菌、芽孢杆菌属(除外炭疽杆菌)、棒状杆菌属、丙酸杆菌属、草绿色链球菌、气球菌、微球菌等,这些细菌在一定条件下仍能引起严重感染,故如从2份或2份以上血培养中分离到同一种细菌,也应结合临床表现,作出病原菌诊断。
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阴性:如培养一定时间(如5~7日)后仍无微生物生长,仪器未予报警,则再经盲目传代后证实无细菌生长,则可见报告为“培养5~7日未见细菌生长”。
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血液标本真菌分离、培养与鉴定(isolation, culture and identification of fungi in blood samples)
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是确诊真菌血流感染的最可靠检验项目,分离的菌种可用于体外药物敏感性试验。相关项目:血涂片检查,体外药物敏感性试验,真菌1,3-β-D-葡聚糖检测。
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[参考范围](血液;手工法和仪器法)未检出真菌。
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[临床意义]疑似阳性的血培养瓶应进行涂片革兰染色检查,发现有真菌孢子应立即报告临床,诊断为真菌血流感染。常见病原体:白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌与热带假丝酵母菌等。
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[应用评价]标本要求:无菌采集。血培养仪发出阳性报警的培养瓶中抽取培养液移种于沙氏琼脂,置35℃和29℃孵育24~48h后观察菌落形态,将分离的真菌进行特异性的代谢试验(包括糖同化和糖发酵试验)鉴定菌株;或接种酵母菌显色培养基,则可在24h得到菌株的鉴定结果,缩短报告时间。
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2.脑脊液标本
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脑脊液标本细菌分离、培养与鉴定(isolation, culture and identification of bacteria in cerebrospinal fluid samples)
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是确诊中枢神经系统细菌感染的最可靠检验项目。相关项目:脑脊液涂片染色显微镜细菌检查、体外药物敏感性试验。
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[参考范围](脑脊液)未检出细菌。
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[临床意义]阳性:检出脑膜炎奈瑟菌为流行性脑脊髓膜炎;检出肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌与链球菌为化脓性脑膜炎感染;检出结核分枝杆菌为结核性脑膜炎;检出厌氧菌或厌氧菌与需氧菌混合感染常为脑脓肿。如脑脊液培养48h仍无细菌生长,则报告为“培养2日无细菌生长”。
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[应用评价]标本要求:无菌采集;脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对外界抗力低,易自溶,故标本应立即置于35℃保温送检。正常脑脊液是无菌的,当病原微生物侵犯中枢神经系统实质、被膜及血管等引起急性或慢性炎症性称中枢神经系统感染。对有脑膜刺激症状、疑为神经系统感染性疾病的病人应做脑脊液培养病原学诊断。
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脑脊液标本真菌分离、培养与鉴定(isolation, culture and identification of fungi in cerebrospinal fluid samples)
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是确诊中枢神经系统真菌感染的最可靠检验项目。相关项目:脑脊液涂片墨汁染色显微镜真菌检查、体外药物敏感性试验,新生隐球菌荚膜多糖抗原检测。
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[参考范围](脑脊液)未检出真菌。
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[临床意义]阳性:检出新生隐球菌可确诊为新生隐球菌脑膜炎;脑脊液培养可见黄绿色毛状菌落生长,经多次培养阳性(因该菌为条件致病),并结合临床表现、脑组织活检或颅脑手术后病理检查(于病理组织中找到曲霉菌)才能确诊本病。
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[应用评价]标本要求:无菌采集;将脑脊液接种于含抗生素的沙氏培养基及血琼脂培养基上,分别在35℃和29℃孵育,观察菌落特点,进一步作生化试验、动物试验鉴定可疑真菌菌种。脑脊液涂片、墨汁染色较易发现新生隐球菌,只有在脑脊液或脑组织标本中检出新生隐球菌才可确诊为新生隐球菌脑膜炎,但脑脊液检查并非每次均能检出该菌,故需多次反复检查。新生隐球菌荚膜多糖抗体、抗原检测阳性有助于诊断,但需注意脑脊液乳胶凝集试验法的假阳性问题。脑脊液涂片染色不易发现曲霉菌菌丝及孢子,脑脊液曲霉培养可提高检出率。
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3.上呼吸道标本
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上呼吸道标本细菌分离、培养与鉴定(isolation, culture and identification of bacteria in upper respiratory tract samples)
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鼻咽拭子、咽拭子、伪膜等上呼吸道标本细菌培养、分离与鉴定是诊断白喉及百日咳病的主要病原学依据,结合临床特征明确诊断。相关项目:白喉棒状杆菌异染颗粒染色显微镜检查。
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[参考范围](上呼吸道标本)未检出白喉棒状杆菌或百日咳鲍特菌。
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[临床意义]阳性:检出白喉棒状杆菌,结合临床特征明确诊断白喉;检出百日咳鲍特菌,结合临床特征明确诊断百日咳。
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