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A:前端金属针(固定针);B:后端金属针(活动针);
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L:指示直线;H:有机玻璃;FS:固定螺丝
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⑷脑深部结构定位确定:按照大鼠立体定位图谱,调整前后、左右、上下的坐标,最后确定电极位置,为插入电极做准备。为证实位置的正确性,可采用普鲁士蓝标志法或连续切片技术。
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●普鲁士蓝标志法:实验完毕,用1.5V电压,电流1~4mA左右通电20~30s即可。然后结扎两侧颈总动脉,剪断双侧颈外静脉放血,再自颈总动脉向中枢端注射生理盐水直至将血液冲洗净,接着注射含1%亚铁氰化钾的10%福尔马林液。取出动物脑浸于10%福尔马林5~7天,而后做切片检查。在电极尖端可见小蓝点。反应式为:
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4FeCl3+3K4Fe(CN)6→Fe4[Fe(CN)6]3+12KCl
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其原理是通直流电时,电极阳极处不锈钢中高铁离子解离沉积下来,与组织内Cl-形成FeCl3,遇到亚铁氰化钾时,则产生普鲁士蓝。
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●连续切片法:在电极头附近,以50μm厚度作连续切片,找出尖端确实部位。
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(二)迷宫系列
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20世纪初,迷宫已经成为心理学家测试动物能力时常用的实验仪器。从那时起,研究者发明了各种迷宫并用其进行动物学习、记忆、空间认知、觅食策略等方面的研究。因迷宫任务具有明显的空间特征,所以迷宫研究结果为理解动物空间信息加工提供了丰富的数据和资料,因此研究者把迷宫更多地应用在对动物学习记忆过程特别是动物空间能力的研究中(王彦、苏彦捷,2001)。
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现将目前常用的几种迷宫介绍如下。
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1.T形迷宫
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T形迷宫由一个起始跑道和一个两端带有凹形食槽的选择跑道组成。规格:起始跑道为500mm×100mm,选择跑道为1000mm×100mm,食槽为一直径20mm的凹形小槽。有的T形迷宫还带有电栅地板和400mm高的护墙。这里介绍的是简单T形迷宫,没有电栅地板和护墙(图2-4)。
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图2-4 T形迷宫
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2.Y形迷宫
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它由三个500mm×100mm规格相等的跑道组成,跑道间的夹角为120°,每条跑道的终端都有一直径20mm的凹形食槽。Y形迷宫的特点是每一目的地都可作为下一次测试的起始点。
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3.旋转式T(Y)形迷宫
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旋转式T(Y)形迷宫在以上两种简单T(Y)形迷宫的基础上发展而成。将跑道部分与终点(起点)区分开,终点(起点)区固定在基座上,跑道部分由电动或手动控制旋转,使T(Y)形跑道可随机对准任意一个终点(起点)区。此类迷宫的跑道和终点(起点)区都装有深色护墙和透明顶盖,终点(起点)区装有照明灯光和食槽;跑道带有电栅地板,跑道的护墙上装有白色发光二极管,电栅及发光二极管均由专用控制器控制,可对大鼠进行电和灯光的刺激(控制器另外介绍)。
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4.八臂迷宫
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八臂迷宫由圆形起始区和8个跑道(臂)组成(图2-5)。圆形起始区直径400mm,有高100mm的护墙,护墙上有等距离的8个80mm×80mm的小门;800mm×100mm的跑道在小门处与起始区相连接,跑道终点为目的区,有一凹形食槽,此种迷宫的跑道没有电栅地板。八臂迷宫主要用于检测啮齿类动物的空间记忆能力,后来由于对迷宫内外标记物的进一步研究,发现它也可用于检测动物的非空间记忆能力。
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图2-5 八臂迷宫
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5.Morris水迷宫
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Morris水迷宫试验(Morris water maze test)(Morris,1981)是20世纪80年代初建立起来的判断动物空间学习记忆能力的重要试验方法,近年来成为神经药理学、神经生理学、老年病学、生理心理学等的常用研究手段。为了更好地开展Morris水迷宫试验,这里介绍由中国医学科学院药物研究所研制的Morris水迷宫系统(图2-6)。
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