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包埋液,蛋白甘油黏片液。
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组织标本块(可利用实验4中制得的脑组织块)。
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【实验内容】
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1.切片
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(1)按要求开启切片机(切片机使用方法见附注1)。
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(2)将组织标本块放在平皿中修整后,置于标本台上,滴加包埋液,使之冷冻。
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(3)按要求装好刀具、防卷板等。
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(4)开启转轮的锁,即可开始切片。
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2.裱片
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(1)裱片前先在载玻片上涂少许黏片液,待用。
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(2)恒冷箱切片机因装有防卷板,可用载玻片直接从刀上取片。用涂过黏片液的载玻片轻轻靠近切片,利用载玻片与箱体内的温度差别,切片会慢慢吸附在载玻片上,如有气泡,用小毛笔轻轻压赶,即可将气泡排出,一张切片就裱好了。
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(3)如使用半导体制冷切片机,裱片操作程序如下:
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⑴用小毛笔将切片轻轻挑下,置入70%酒精溶液或水中;
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⑵将载玻片伸入水中慢慢托起切片,使切片平整地贴在载玻片上;
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⑶用毛笔排除气泡,用滤纸吸干切片周围水迹即可。
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3.收藏
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切片裱完后,收藏在切片托盘中干燥保存,待干燥后进行染色。
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4.清洁
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切片完成后,将切片机断电化冰、除霜、干燥,打扫工作台,清洗用具。
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【实验结果】
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(1)切出4~6张片子,包括前连合、后连合、胼胝体连合等脑区,部位要准确。
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(2)片子完整干净,没有气泡、褶皱。
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附注1 CRYOCUT 1800恒冷箱切片机简单操作说明
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1.操作步骤
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(1)开启电源。
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