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1701463346 3.“冰晶”问题
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1701463348 组织块中的水分在冰冻过程中可形成冰晶,如冰晶过多过大,在显微镜下可见许多如冻豆腐状的小空隙,严重影响切片的质量和观察。为防止冰晶的出现,常用的办法是在冷冻前将组织在含30%蔗糖的福尔马林液中浸透。蔗糖福尔马林液的比重较大,组织块放入后浮在液面上,待蔗糖福尔马林液逐步浸入,组织块下沉后,即可进行切片。用10%~30%的蔗糖福尔马林液均可不同程度地防止冰晶的产生,做出好的切片。另一种方法是:可将切片在裱片之前置于70%的酒精溶液中浸泡,使切片缩水,以防止冰晶出现。
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1701463350 附注3 切片制作过程中的注意事项
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1701463352 (1)爱护机器的每一个部件,轻拿轻放。
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1701463354 (2)机箱内的温度传感器是恒冷箱切片机的核心部件,没有特殊问题请勿拆卸挪动。
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1701463356 (3)上刀时,刀片不要碰到其他物体,以免损坏刀刃。
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1701463358 (4)正确使用护刀板,以免将组织标本或手碰伤。
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1701463360 (5)有水的毛笔不可在冷冻箱内使用,以免与标本块冻结在一起。
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1701463362 (6)切片过程中,不要长时间打开箱盖,以免影响制冷效果。
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1701463364 (7)裱片时,要稳、准,不要着急,尽量使切片放正,少出气泡。
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1701463366 (8)在每次裱片前和切片机用完后,务必将转轮锁好(将转轮缺口对准黑点)。
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1701463368 (9)关闭电源须在制冷停止时进行。
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1701463370 (10)切片完成后,务必清理冷冻箱内的标本残留物,擦干水迹并使之干燥,以防止机器锈蚀损坏。
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1701463372 (周茵)
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1701463379 现代生理心理学实验教程 [:1701461761]
1701463380 现代生理心理学实验教程 实验6 脑组织切片的制作(三)
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1701463382 ——脑组织切片染色方法之一:尼氏染色
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1701463384 【实验目的】
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1701463386 通过对几个典型切片进行观察,进一步了解大脑的内部结构;初步掌握神经组织染色的基本技术。
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1701463388 【理论基础】
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1701463390 尼氏染色法是德国病理组织学家F.Nissl(1860~1919)在1892年创立,以发明者姓氏命名,以发现尼氏体及尼氏变性等而闻名。尼氏染色法给中枢神经的研究开辟了细胞构筑学的途径。
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1701463392 尼氏染色是用碱性染料染神经组织的一种方法。神经组织中可与碱性染料结合的主要成分是核酸(DNA与RNA),神经元胞体中有大量核糖核酸,主要以尼氏体的形态存在。所以,一般借尼氏体来辨认或鉴定神经细胞的存在和它们的分布以及是否发生病理性改变。
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1701463394 为了检验实验动物大脑损毁或埋藏电极的位置,通常使用尼氏染色法。
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