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2.大鼠脑的立体定位图谱及LH区的坐标
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在本实验所用的图谱版本中,LH的坐标为:AP—2.2mm,R(L)—2.0mm,H—7.8mm。
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3.立体定位仪的调节及使用
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(1)用水平仪将定位仪主框调节至水平位置。
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(2)将耳杆固定柱固定在约12cm处;将上颌固定器固定在主框中点。
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(3)将门齿固定槽调至低于耳杆中点2.4mm。
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(4)调节电极移动架,使三个移动滑尺相互垂直。
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调节完毕后,参见第一章相关内容,学习使用方法及注意事项。
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4.动物的麻醉及术前准备
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大鼠称重后,按3.5mL/kg体重腹腔注射10%的水合氯醛溶液麻醉动物。动物开始麻醉后,将其固定在定位仪上,并将头顶备皮(面积约2cm×3cm)。用75%酒精棉球擦拭手术器械。手术须等动物完全麻醉后(约过15分钟)再开始。
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5.手术过程
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(1)用75%酒精棉球对动物头顶备皮处消毒,然后用手术刀作一个1.5~2.0cm的正中切口,并切开皮下筋膜。
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(2)用镊子夹一干棉球将切口分开,暴露前囟,并用铅笔做标记。
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(3)用移动滑尺标出头骨钻孔处位置,然后用丝锥在头骨上钻孔,注意勿过深。
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(4)将电极固定于电极移动架上,依照坐标将电极尖端旋至LH部位。
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(5)将牙托粉和自凝牙托水混合成略稀的糊状,与螺丝和电极一并固定于动物头骨上。待牙托粉成形凝固后,取下电极夹。将动物送回休养,1周后,继续进行实验。
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6.电刺激LH
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在进行电刺激前应使动物吃饱并摄取足够的水。
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(1)刺激参数:电流50~100μA,时间2~5s。
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(2)将恒流输出仪调整参数后与电极座连接好,刺激三次,每次间隔至少5min,观察并记录刺激后动物的摄食、饮水情况。
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7.电解损毁LH
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(1)将动物麻醉,进行双侧阳极损毁。恒流直流电源的阳极接在埋藏电极的插座上,阴极接在动物的背部皮肤上,以下列参数电解LH,脑组织的损伤范围直径约为1.5mm左右。刺激参数:电流1.0mA,时间5~10s(对照组动物不做此步骤)。
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(2)损毁完毕后,在切口处撒少许消炎粉,然后将伤口缝合,每针间距约为3~5mm。
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如果只做损毁不做电刺激步骤可直接使用单极电极。
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8.水及食物的供给和行为观察
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