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(4)在大鼠腹部下2/3处做一纵向切口(约3cm),开腹。
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(5)用镊子找出靠近背部的两侧卵巢,分离脂肪组织,结扎两侧输卵管后,切下大鼠卵巢(图6-2)。
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(6)器官组织复位后,腹腔滴注少量卡那霉素注射液。
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(7)关腹分层缝合:肌肉连续缝合,皮肤间断缝合。
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(8)用生理盐水擦拭皮肤血迹,切口部位撒消炎粉。
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(9)第一组大鼠不摘除卵巢,只行切开与缝合腹壁和皮肤的手术。
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图6-2 大鼠卵巢
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引自解景田,赵静,2002,p.196
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4.手术实验观察
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手术后动物休息三天,第四天开始正式实验,实验前检查各组大白鼠的阴道涂片。然后用雌雄配对的方法对性行为进行观察,观察内容为:
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(1)雌鼠主动接近雄鼠的次数。
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(2)雌鼠接受雄鼠爬背的次数。
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(3)雌鼠发情时表现出的跳跃、突发式窜动和耳朵颤动等情况。
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(4)雌鼠脊柱前凸次数。
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每只鼠观察15min,将观察结果记录下来作为雌二醇注射前的性行为情况。
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5.药物实验观察
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在手术实验观察后给第三组雌鼠注射雌二醇1mL,每天注射一次,共注射三天。第一、二组每天注射等量的生理盐水。第四天第三组大鼠注射雌二醇后,接着注射黄体酮1mL,6小时后采用雌雄配对的方法进行性行为观察。观察内容同前,将结果记录下来和上次记录一起进行比较分析。
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在观察性行为前再检查一次各组大鼠的阴道分泌物,观察它们进入动情周期中的哪一期。
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【说明及建议】
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(1)用棉签取阴道分泌物后,立即涂片,干后镜下观察,棉签使用专一,不要混用。
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(2)上述观察的性行为内容,不一定每一次每个大鼠都出现。
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(3)去卵巢后,大白鼠阴道涂片可能不会马上停留于动情间期,如仍在其他时期则可继续饲养几天再观察。
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(肖健)
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