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（4）50mmol/L乙酸钠-柠檬酸缓冲液（流动相）：教师预先配制。无水乙酸钠4.10g，柠檬酸9.50g，EDTA（乙二胺四乙酸二钠）111.6g,100%甲醇20.0mL，B-8离子对试剂4.0mL，加蒸馏水定容至1000mL。
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（5）建立睡眠剥夺动物模型：将大白鼠放入条件反射箱内，箱底的铜栅可通电，由电子刺激器自动每隔5min通电一次，电压50V，电流1mA，24小时剥夺睡眠。
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【实验内容】
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1．制备组织样品
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将剥夺24小时睡眠的大鼠断头取脑，在冰水中迅速分离出皮质、中脑、脑桥和延髓4个脑区（图6-3）。称取10～30 mg脑组织，置于300μL预先冷却的0.1 mol/L过氯酸中，根据脑组织多少加入1～2滴内标物DHBA，超声波粉碎机匀浆，然后高速离心（15000 r/min）15分钟。
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图6-3 大鼠脑分区示意图
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2．进样分析
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取离心后上清液10μL进样，打开仪器。调整色谱条件为：流动相为50mmol/L乙酸钠柠檬酸缓冲液（pH3.5），流速1.0mL/min，玻璃工作电极，Ag/AgCl参比电极，检测池电压为＋0.75V，DHBA为内标物，样品中每个组分用内标分析法进行定置，结果由HP3394积分仪计算并直接打印。
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3．对照组
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将正常饲养的对照组大鼠按照上述程序测定5-HT与NE。
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4．结果
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剥夺睡眠大鼠的中脑和脑桥两部分脑组织的5-HT含量比正常大鼠要高，NE要低。有研究表明，中脑和脑桥部分的网状结构对控制和维持觉醒状态是极其重要的。中缝核的前核细胞产生5-HT抑制黑质和蓝斑产生多巴胺和NE，引起慢波睡眠。如果剥夺睡眠，就会使中缝核分泌的5-HT积累起来，而NE因受抑制而含量减少。
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【说明及建议】
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（1）正式测定前需让高效液相色谱仪运转较长时间，这样仪器比较稳定，测出的结果比较好。
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（2）积分仪需根据实际情况调整灵敏度、增益等参数，以达到最佳的记录效果。
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（肖健）
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现代生理心理学实验教程 [:1701461766]
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现代生理心理学实验教程 实验10 电刺激引起的大鼠的侵犯行为
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【实验目的】
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观察皮肤电刺激和脑电刺激引起的种内和种间的侵犯行为，以及动物对无生命对象所产生的攻击行为。
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【理论基础】
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