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(游离物F) 复合物(B)
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当标记物为一定量与抗体为有限量时,加入的被测物或标准物与标记抗原-抗体复合物之间呈现一种函数关系,即被测物或标准物的量越多,则标记物被稀释的程度越大,使标记抗体复合物的量减少。在测定中,放射性量也降低。
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2.试剂与仪器
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CH2Cl2(分析纯级,重蒸馏),闪烁液(按附件2方法配制),液体闪烁计数器(FT1907北京核仪器厂),3H皮质酮放免药盒(Sigma公司生产)。
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3.实验方法
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用Sigma公司生产的3H标记的皮质酮放免药盒。动物血浆0.1mL置于带磨口的试管内,用CH2C125mL反复振摇抽提5min。CH2C12层用双蒸水洗两次,取双份1mL抽提液放于两支试管内,在45~50℃水浴中蒸干;再按试剂盒说明操作;最后以10mL闪烁液,用液体闪烁计数器分析测定。从结果来看,应激后的小鼠血清皮质酮的含量比对照组要高。
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(肖健)
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现代生理心理学实验教程 第九章 高级心理过程的脑基础
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实验28 人体大脑诱发电位的描记与分析
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【实验目的】
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使用视觉刺激诱发大脑电活动,通过对脑电的记录与分析,了解脑电实验和事件相关电位技术的基本知识,以及视诱发电位的特点。
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本实验为演示实验,主要由教师完成,学生通过现场观看演示形成初步认识。
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【理论基础】
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在神经系统进行信息加工时,大脑有关区域会出现大量神经元同步放电的现象,从而产生在头皮表面能够观察到的脑电(electroencephalogram,EEG)活动。诱发电位(evoked potential,EP)是指神经系统由刺激引起的电活动,与引起诱发电位的刺激具有时间锁定关系。所以,通过刺激锁定(stimulus-locked)的叠加平均方法可以提高信噪比(signal-to-noise ratio,SNR),将刺激引起的脑诱发电位提取出来。通过N次叠加,信噪比将提高N的平方根倍。这种通过叠加平均得到的与某些外部刺激或心理过程(即“事件”,event)相关的脑电位称为事件相关电位(event-related potential,ERP)。
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脑电的记录系统采用差分放大器(differential amplifier),每个放大器均有两个输入端。放大器可以将两个输入的电压值之差放大进行输出,输出值经过数模转换(analog-to-digital conversion)后由计算机记录下来以备分析。在脑电记录与分析系统中,每一个这样的输入-输出单元称为一个导联(channel)。在目前常用的脑电记录系统中,通常头皮表面大部分位置的电位记录均使用单极(monopolar)导联的记录方式,即在这些导联中,差分放大器的一个输入端均来自同一个电极,另一端则来自头皮表面需要记录脑电的特定位置。这个对大量差分放大器提供同一个输入电位值的电极称为参考电极(reference electrode),应该选择在脑电、肌电、心电等电活动较弱的部位,以免给大量的导联带来影响。理论上的参考电极应该在距离头部无限远处,显然这是不可能做到的。实践中,常用的参考电极位置有乳突(mastoid,耳后的骨骼突起)、耳垂、鼻尖等。
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除了单极导联,有时还需要使用双极(bipolar)导联的记录方式,这种方式与单极导联的唯一差别是差分放大器的两个输入来自两个在空间上相距不远的电极,这种方式可以记录下这两个电极间的差异。最常见的例子是眼电(electro-oculograph,EOG)导联,输入到同一个差分放大器两个输入端的两个电极分别固定在眼眶的上下(垂直眼电,vertical EOG)或左右(水平眼电horizontal EOG),可以用于检测眼睛的运动。
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对于多导联脑电记录时电极的位置,有国际标准可循,目前最通行的标准是10~20系统(10~20 system)。该标准取鼻根(nasion,即鼻梁上端的最凹处)到枕骨隆突(inion,即枕部的骨骼隆起)沿头皮表面测量的距离为前后距离的100%,左右耳前点(preauricular point,即耳廓前面的最凹点)沿头皮表面测量的距离为左右距离的100%。在此基础上,电极相距20%的距离放置,且最边上的电极距测量边缘10%的距离,10~20系统由此得名。10~20系统定义了19个头表电极,在使用更多导联的脑电记录系统中,可以使用该系统的扩展版本10~10系统或10~5系统。
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在视觉刺激条件下,通常会产生颞枕区分布的P1(潜伏期100ms左右的正波)、后部N1(潜伏期150ms左右的负波)成分,额中央区分布的前部N1成分(潜伏期130ms左右的负波),以及在顶区最大的P3成分(潜伏期300ms以上的正波)等视诱发成分(如右图)。大脑后部的P1、N1成分产生于外纹状皮层(extrastriate cortex),反映了视觉信息通道中早期的感官阶段处理过程。在P1之前,有时还可以观察到C1成分(潜伏期80ms左右的正波或负波)。C1成分产生于纹状皮层(striate cortex),分布于顶枕区中央。由于视觉通道的视野对侧投射关系,并且纹状皮层折叠于矩状裂(calcarine fissure)中,上视野刺激产生负电位的C1成分,下视野刺激产生正电位的C1成分(图9-1)。
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图9-1
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