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实验3 观察大鼠脑组织大体结构
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——学习马利根厚片染色法
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【实验目的】
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利用马利根染色法可将大脑灰质与白质染成不同颜色的特点，观察区分灰、白质及灰质核团分布的位置，学会从冠状面、矢状面认识大脑内部结构。
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【理论基础】
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马利根大脑厚片染色法最早于1931年开始使用，由发明人Milligan的名字命名，经过反复实验和改造，现已较为成熟适用。
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厚切片是观察脑内部结构的方法之一。脑片厚度为1.1～2mm，甚至20mm或更厚。利用马利根染色法染色，可分别将灰质与白质染成不同的颜色，借以用肉眼观察区分灰质、白质以及灰质核团的分布位置。
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【实验对象】
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兔或大鼠脑组织标本一个。
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【实验用品】
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（1）常用手术器械一套，量杯，量筒，弯盘，竹夹，玻璃棒，温度计，电炉，刀片。
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（2）药品
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⑴固定液：10%福尔马林。配制方法：10mL的甲醛水溶液加入90mL的蒸馏水配制而成。
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⑵染液Ⅰ：石炭酸40g，硫酸铜5g，浓盐酸1.25～1.5mL，蒸馏水1000mL。
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⑶染液Ⅱ：1%三氯化铁500mL，加入0.2%冰醋酸。
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⑷显色液：1%亚铁氰化钾水溶液。
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⑸保存液：含有2%盐酸的10%福尔马林。
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⑹黏片液：10%～15%明胶水溶液。
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【实验内容】
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（1）剥取动物脑组织后用10%福尔马林固定。
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（2）切片：1～2mm厚。注意：⑴切片刀用热水清洗；⑵切记，不得来回拉刀，一刀切到底。
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（3）冲洗：流水冲洗1～2天，蒸馏水洗12小时（或水洗24小时，蒸馏水过夜）。
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（4）浸脑厚片：浸入染液Ⅰ5min。注意：⑴此液必须浸没脑片，高出脑片3～5cm；⑵用竹夹（或玻璃棒，禁用金属镊子）将脑切片放入温度加热至60～65℃的染液中，并不断翻动，直至切片呈青白色；⑶温度不得高于70℃，否则颜色过深；⑷按染液Ⅰ配方配制溶液一份，可染人大脑厚片6～7片。
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（5）5min后取出，即放入大量冰水中浸洗2min。
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（6）浸入染液Ⅱ1～3min，直到灰质部分明显可见时取出，时间约为2min。
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