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1700556020 1966年,罗氏公司的副总裁约翰·伯恩斯(John Burns)说服在美国NIH工作的悉尼·伍登法兰(Sidney Udenfriend)加入罗氏公司,并在新泽西州领导建立专门的研究机构——罗氏公司分子生物学研究所(Roche Institute of Molecular Biology),并请伍登法兰担任首任主管。1967年,悉尼·佩斯特卡(Sidney Pestka)加入了这一机构,并开始干扰素方面的研究,佩斯特卡开发了反相高效液相电泳,用这一技术,他于1978年和艾伦·瓦尔德曼(Alan Waldman)分离得到了干扰素-α(IFN-α)。
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1700556022 捷克科学家扬·T.维尔切科(Jan T. Vilček)于1959年开始,在捷克科学家病毒研究所开始研究干扰素,并召开了第一次针对干扰素的国际学术会。1965年,他移民到美国,在纽约大学微生物系担任副教授。他与同事分析了IFN-α和IFN-β的不同抗原特性,并研究了干扰素-γ(IFN-γ)。他们还研究发现了一种从人二倍体成纤维细胞中生产IFN-β的方法,使得干扰素进入临床,并在德国和日本上市。但这种方法生产的干扰素最终被基因重组干扰素取代。后来,维尔切科(Vilček)还参与到了TNF-α单抗药物的开发当中。
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1700556024 1980年,查尔斯·魏斯曼(Charles Weissmann)通过基因克隆技术,得到干扰素的基因克隆并建立了体外表达体系。发现干扰素被一个相关联的基因家族编码,并且干扰素的抗病毒作用也被证实。
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1700556026 在此之前,卡里·坎泰尔(Kari Cantell)与芬兰血库合作,首先从血液富集白细胞然后再从中提取干扰素,然而效率非常低。而通过基因重组,把干扰素基因整合到大肠杆菌或酵母中,然后通过发酵得到干扰素的方法,使干扰素成本大为降低。
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1700556028 很多企业通过基因重组的办法来生产干扰素,其中包括刚成立的瑞士德彪公司。成立于1971年加州伯克利的塞特斯公司(Cetus Corporation)也开始与曲通(Triton Biosciences)公司合作开发干扰素,希望成为一种抗病毒药物。但他们得到的是干扰素-β1b(Interferon beta 1b,IFN-β1b),对病毒没有作用。
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1700556030 塞特斯公司的主要产品其实是白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)。IL-2是一个非常重要的细胞因子,它是第一个被克隆的细胞因子,其受体也是第一个被克隆的细胞因子受体,在研究这一细胞因子过程中,取得了很多生物发现。
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1700556032 IL-2于20世纪60年代中期发现,白细胞在某些介质中,生长可以加快。20世纪70年代中期发现,用植物血凝素刺激正常人淋巴细胞后,其产物加入到骨髓培养液中,可以使T细胞选择性扩增。1979年,在小鼠细胞中分离了这种物质,1980年,在人细胞中分离了这种物质[2]。
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1700556034 20世纪80年代,包括塞特斯公司、基因泰克公司以及英姆纳克斯(Immunex)公司等企业都在竞争克隆IL-2的基因。日本科学家谷口维绍(Tadatsugu Taniguchi)是查尔斯·魏斯曼的博士生,他于1978年在苏黎世大学获得分子生物学学位,在此期间他协助魏斯曼进行了IFN-β的基因克隆。回到日本后,他在东京癌症研究中心工作。1981年,他克隆了IL-2基因。
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1700556036 1983年,塞特斯公司也成功克隆IL-2并建立了表达体系,并与史蒂夫·罗森堡(Steven Rosenberg)合作展开临床试验。安进公司也得到了一个IL-2克隆(两个基因克隆体系表达的个别氨基酸有差异),双方一开始在科研上竞争,但进入临床阶段后,便闹上了法院。最终安进公司输了官司,被迫退出这一领域。塞特斯公司的临床实验发现IL-2对肾癌有着不错的疗效,但同时也发现本品有较大的副作用。
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1700556038 1990年,在IL-2已经在欧洲多个国家上市的情况下,美国FDA拒绝其新药上市请求,要求其补充资料。这给塞特斯公司带来了一场灾难。虽然1981年,该公司在IPO时募集到了1亿多美元。但中间开发各种生物制剂,又投资让公司的员工卡雷•班克斯•穆利斯(Kary Banks Mullis,1944— ,1993年诺贝尔化学奖获得者)研发PCR及仪器,并开发其他医疗器械。而且,投入巨大的IFN-β1b对病毒无效,这些都让塞特斯公司财务资金见窘。
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1700556040 于是,几个星期后,塞斯特公司CEO辞职,PCR的专利权转让给了罗氏公司。这仍挽救不了公司的颓势,1991年,希龙公司(Chiron Corporation)收购了塞特斯公司。继续投入资金后,1992年,IL-2终于获批在美国上市,商品名为Proleukin。随后,罗氏、葛兰素公司都开发了自己的IL-2产品。2006年,诺华公司收购了希龙公司,并在2010年把IL-2卖给了普罗米修斯实验室(Prometheus Laboratories)公司。
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1700556042 在成功把IL-2推上市后,希龙公司又收集了干扰素的资料,把IFN-β1b的研究继续下去,发现它对治疗多发性硬化症(multiple sclerosis)有效果,于是1993年,IFN-β1b也得以上市。德国的先灵公司在更早的时候就把IFN-β1b推向了市场。
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1700556044 另外,开发干扰素的还有百健(Biogen)公司。该公司于1978年在瑞士日内瓦成立。创立者中包括英国爱丁堡大学的肯尼思·默里(Kenneth Murray)、MIT的菲利普·夏普(Phillip Sharp)、哈佛大学的沃尔特·吉尔伯特(Walter Gilbert,首任CEO,成就包括优化基因测序方法,纯化乳糖操纵子,描述基因的外显子和内含子等)和苏黎世大学的查尔斯·魏斯曼(负责第一个产品:干扰素αinterferon alpha)。吉尔伯特因对基因序列的研究获得1980年诺贝尔化学奖,夏普因对游离DNA的研究获得1993年诺贝尔生理学或医学奖。
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1700556046 2003年百健公司与圣地亚哥的艾迪公司(IDEC Pharmaceuticals)合并为百健艾迪公司(Biogen Idec.)。现在又重新改为百健(Biogen)公司。
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1700556048 极简新药发现史 [:1700552801]
1700556049 上天眷顾细心的眼睛:链激酶的发现
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1700556051 约翰·霍普金斯大学的副教授威廉·史密斯·蒂利特(William Smith Tillett,1892—1974,他于1930年与同事还发现了一种与肺炎球菌C-多糖反应的蛋白,即C-反应蛋白)在研究心肌梗死时,发现溶血链球菌在人的血浆中发生凝集现象,但在人的血清中却不会凝集。这一细节吸引了蒂利特的注意。
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1700556053 蒂利特认为这是由于血清中缺少了某种因子导致的,即纤维蛋白原。他设想,溶血链球菌把纤维蛋白原吸附于自身表面激活,所以发生凝集。那么当血浆中的纤维蛋白原被链球菌吸附后,血浆便不会凝结。于是他设计实验进行验证。
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1700556055 他首先把血浆草酸化,没有了钙离子,血浆不会凝块。然后在对照试管中加入钙,其余试管中加入溶血链球菌和钙,不过,实验结果是:所有试管里的血浆全部凝结了。
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1700556057 蒂利特有些失望,但保留了这些试管,不时前来观察一下有无变化。在他决定处理前最后一次观察时,发现有一个加入了溶血链球菌的试管血凝块开始溶解了。于是他推翻了自己的原先设定,认为这是由于溶血链球菌分泌了某一物质引起的血凝块溶解。
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1700556059 他们研究了不同动物和人的血浆,以及不同菌株进行交叉比较研究,终于在1933年发现了溶血链球菌果然分泌了一种可以溶解纤维蛋白原的物质,但这一反应特异性非常强。1934年,蒂利特分离了这一物质,并指出这是一个蛋白酶。
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1700556061 立达实验室(Lederle Laboratories)公司跟进,并于20世纪40年代开始支持本品的临床试验研究,但最终因工艺问题于60年代放弃这一项目。不过,欧洲贝林公司在40年代就开始生产这一物质。经过长期的研究,贝林公司推出了这一产品抗凝结药链激酶,商品名溶栓酶。一项对588名患者,另一项对268名患者的临床验证,把链激酶直接注入冠状动脉,可以溶解血栓。尤其是血管栓塞的最初几个小时,本品能提高生存率。
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1700556063 蛋白质链激酶在萃取后要彻底净化,但是这种药剂有时会引起过敏反应,因为接触过链球菌的人会在血清中保留相应的抗体,从而导致过敏。而尿酶,可以同样溶解血栓,却没有过敏风险,因为这种物质在肾脏中产生,并出现在尿液中。立达实验室公司放弃链激酶的一个原因就是他们转而开发尿酶。但最初的尿酶是从尿液中提取,所以要900升尿才提取出一个治疗剂量,生产成本很高。
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1700556065 极简新药发现史 [:1700552802]
1700556066 来自水蛭的抗凝药:重组水蛭素的发现
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1700556068 1884年,约翰·贝里·海克拉夫特(John Berry Haycraft)从水蛭中发现一种抗凝物质,他称为水蛭素(hirudine)。但这种物质提取不易。基因工程出现后,水蛭素就可以通过基因重组的办法很容易生产出来。两种重组水蛭素乐匹卢定(lepirudin,拜耳公司推出)和地西卢定(desirudin,瓦利安特制药推出)很快被推向市场。而水蛭素的类似物和比伐卢定(bivalirudin)等也被积极开发。
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