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治疗肝纤维化已有较多的研究包括祛除病因、抗HBV基因治疗和抗肝纤维化治疗。前者另有专门介绍，本章从略，现仅介绍后者。人们更为重视的利用分子生物技术，发现有效的靶向抗肝纤维化治疗方法（药物），目下列为靶标的有抗肾素—血管紧张素系列（RAS)、GTGT拮抗选择性抑制Smad3小分子，下调NK-κB及PPARγ（激动剂），以及新近研究的大麻素受体1（CB1)、骨形态发生蛋白7（BMP-7）神经营养素受体（neurotrophin receptor P75NTR）等，这方面已有较多报道，本章仅作简介。
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（一）抑制HSC活化
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抑制HSC活化，减少ECM生成，包括TβRⅠ和TβRⅡ反义核糖核酸PDGF受体或PDGFβ反义互补DNA、瘦素、SiRNACB1、BMP-7、P75NTR, 后3者最引人注目。
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1．CB1
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CB1拮抗剂体是治疗肝纤维化新的方法，CB1受体阻滞剂可以降低肝脏对急性损伤的修复反应，抑制肝纤维化的发生发展，敲除CB1基因小鼠TGFβ1表达减少，HSC活化抑制，胆汁性肝硬化肝组织中CB1受体表达较正常者增加，日本血吸虫病肝纤维化小鼠约增加2倍，并与门脉高压发生有关。其机制被认为是通过HSC的活化与肝内免疫调节，还有被认为是通过活化Th1细胞促进IFN-γ分泌，提高血清脂联素水平，降低胰岛素抵抗及促进MFB凋亡，从而达到溶解ECM的作用。2006年6月欧洲市场上已有供应其阻滞剂rimonabant（SR141716A)。近获悉正在开始多中心、大样本的临床研究。
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2．BMP-7
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Kinoshita等（2007）在整体水平与细胞水平证实腺病毒介导BMP-7在HSC内表达可抑制Ⅰ型胶原和α-SMA的合成。BMP-7维持肝脏健康，促进肝脏再生，具有抗炎与抗肝纤维作用。BMP-1于1990年被克隆，是TGFβ的亚（家）族，具有刺激成骨作用。最初是在作用一种可在异位诱导骨和软骨形成的蛋白中被发现。从牛生骨蛋白质中提取，是经胰蛋白酶作用产生的肽类。Sungimoto等研究认为BMP-7是一种新的促肝脏再生的激素，BMP-7是有关肝脏发生与发育的关键蛋白，血循环浓度100～300μg/ml，正常肝脏不表达BMP-7，但受体存在成熟肝细胞上，可能具有内源性调节肝细胞增殖和肝脏内环境稳定作用。肝脏部分切除，BMP-7促进肝脏再生，给予重组人BMP-7后显著增强肝脏再生及促进肝脏功能；还证明肾与骨产生的BMP-7内源性的肝细胞健康的调节者。肝病专家评论指出，BMP-7与TGFβ是两者相互拮抗的细胞因子，作用于不同的细胞表面受体。细胞内信号传导通过Smads系统，BMP抑制EMT, 提示BMP-7是一个有前途的治疗肝纤维化的靶点。有认为BMP-7还有抗凋亡和抗炎症作用，TGFβ1/BMP-7比值是估价肝纤维化进展速度及判断预后的有用指标。BMP-7是一个老药，FDA在2004年批准基因工程产品，OP-1PUTTY用于临床脊柱融合手术。BMP-7已进入临床应用。2007年某杂志误译为骨髓蛋白7。
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3．P75NTR
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2007年《Science》发表了Passino等“神经营养素P75NTR调节肝星状分化”的论文。P75NTR是TNF受体亚族，在肝纤维化和肝硬化的肝脏损伤后HSC内表达，是肝脏修复的调节者。在小鼠体内P75NTR耗竭时，加重肝脏的病理和抑制肝细胞的增生。P75NTR-/-的HSC不能分化到MFB; 不能维持肝细胞增殖，P75NTR的信号的抑制可减少GTP酶Rho导致的损伤HSC的分化，此研究证实患病的肝脏中，P75NTR可调节HSC分化和维持肝细胞再生。肝病专家以“简单的真理是很少正确的，真理从不简单：P75NTR对HSC的分化与死亡的双重作用”为题做评论并综述这方面的研究进展，提出人们将揭示在肝脏中使人有极大吸引力的一个调节网络，应进一步研究。
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（二）促进HSC凋亡，抑制肝细胞凋亡
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活化的HSC是ECM的主要来源，促其凋亡可促使纤维化的消退，而在肝细胞则相反，肝受损后肝细胞凋亡后，可诱导HSC的活化。现已研究发现IFN-γ与扶正化瘀胶囊均有抑制肝细胞凋亡和促进活化HSC的凋亡的作用。在细胞凋亡的调节中，Fas-FasL系统是凋亡调节过程中的重要因素，研究发现可溶性FasL诱导的HSC凋亡是一种蛋白和RNA合成依赖过程，如果用环酰胺阻断蛋白人工合成或用放线菌素D阻断RNA的合成，可溶性FasL诱导的HSC凋亡即受抑制。采用多霉黏素（gliotoxin)——真菌抗代谢药物，在动物体内可选择地诱导HSC凋亡，减轻肝纤维化。Zou等（2007年）发现合成YLGA肽，通过中止蛋氨酸作用，抑制肝细胞凋亡和肝损伤而达到治疗脂肪性肝炎肝纤维化的目的。
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（三）促ECM降解
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主要是导入MMPS和其活性调节因子的表达，抑制TIMPs的表达。Roderfeld等（2006）将MMP-9突变体插入腺病毒载体，在CCl4诱导大鼠肝纤维化模型中，能捕获TIMP-1减少血管压及周围的胶原沉积，肝脏羟脯氧酸含量及肝纤维化标志物mRNA都显著降低，在体内外研究均显示MMP-9突变体均能抑制HSC活化，促其凋亡。Hu等采用靶向TIMP2的SiRNA治疗CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，能抑制HSC活化促进ECM降解和促进肝细胞再生。
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（四）其他方面
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肝细胞生长因子与表皮生长因子均能诱导肝细胞增殖，促进肝细胞再生可能成为肝纤维化基因治疗的一种手段，但对前者诱导肝细胞癌生长有不同看法。另外IL-10、IFN-γ及α-黑色素细胞刺激素（α-MSH）均能抑制肝纤维化，而单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）可刺激纤维化发生，这些可通过诱节细胞因子抑制间质炎症反应也是肝纤维化基因治疗的重要策略。特别是MSH是一种神经内分泌激素，近发现α-MSH对动物生理活动发挥广泛的调节作用。包括对成纤维细胞。Wang等（2006年）用电穿孔方法诱导α-MSH表达质粒导入硫代乙酰胺大鼠肝细胞化模型，能降低TGFβ1、Ⅰ型胶原及细胞黏附分子的mRNA水平，减少α-SMA和环氧合酶-2的表达。增强MMP活性，使TIMPs失活，α-MSS能逆转肝纤维化。
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六、基因工程药物及疫苗
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通过基因工程生产真核细胞中微量、超微量合成的多肽或蛋白质，如激素、酶、神经递质、疫苗等，用于临床、科研、工农业、畜牧业乃至满足人们生活上的需要。血液中干扰素的含量只有105U/L, 用基因工程菌可生产含量为1011U/Lα-干扰素低营养培养物。利用转基因动物生产多肽药物，把动物看成是合成多肽药物的生物反应器，从而形成了合成活性多肽和蛋白质药物的新颖、廉价的技术路线。利用基因工程生产蛋白质有以下特点：①方法简便、可行；②适合大量获得目的基因的表达产物；③可实现常规无法解决的问题。
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抗肝纤维化基因工程药物——IFN-γ是目前认为最强的抗肝纤维化药物。IFN-γ是NK细胞和T淋巴细胞产生的细胞因子。上海克隆生物高科技有限公司生产的注射用重组人IFN-γ（克隆伽玛）于2001年11月通过SFDA新药审评中心评审，成为世界上第一个由政府批准的抗肝纤维化生物制品。
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浙江大学附属医院在IFN-γ抗肝纤维化的研究方面做了大量工作，体外实验、动物实验与临床研究均有甚多报道。国内外研究得最多的抗肝纤维化药物是IFN-γ。笔者等曾作过综述，从体外与动物实验肯定了其抗肝纤维化疗效。近翁红雷等报道原代培养HSC, 细胞生长2d和7d给予IFN-γ和（或）TGFβ刺激，Western blot观察细胞因子刺激后STATC信号转导和转录激活及Smad蛋白表达，免疫组化方法观察IFN-γ治疗前、后慢乙肝肝纤维化患者肝组织Smad蛋白表达变化。结论STAT途径是IFN-γ在HSC的信号传导途径IFN-γ可诱导产生HSC Smad7蛋白表达。并有剂量依赖关系。后者抑制TGFβ信号传导可能是IFN-γ抗肝纤维化可能机制之一。Saile等报道IFN-γ促进活化HSC凋亡，而IFN-α则不能。IFN-γ尚有抑制IFN-α的信号传导，不利于其对丙肝的治疗。
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经3种不同剂量的IFN-γ治疗3种不同动物模型肯定了IFN-γ抗肝纤维化的疗效，在1998年12月通过SFDA专家评审，批准进行临床研究，新药研究批件由浙江大学附属一院牵头，北京、上海、重庆、武汉、广州等医院参加协作，经2年共同研究，2002年获准IFN-γ作为抗肝纤维化治疗药物。临床研究治疗完成慢乙肝肝纤维化的289例，IFN-γ组153例，对照组136例，治疗结束时，接受2次肝活检83例（治疗组54例，对照组29例），疗效判断、肝活检以SSS计分下降5分显效，下降2分有效；非肝活检者以主要肝纤维化指标下降60％，症状消失，门脉主干内径宽达正常，脾脏缩小为显效；有效为肝纤维化指标下降40％，症状消失，门脉主干内径及肝缩小；未达显效与有效者为无效。总有效率为66％，显效2.2％，对照组14％（显效5.6％），肝活检组有效63％（显效27.8％），对照组24.1％（显效13.8％）。其中26例代偿期（早期）肝硬化者，5例肝小叶达正常。
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翁红雷等研究证实了IFN-γ不仅对HSC有作用而且对肝纤维化的肝细胞也有作用，慢乙肝纤维化患者经IFN-γ治疗9个月后，肝组织学免疫组化发现肝细胞的CTGF、Smad3下降，而Smad7增长，其差异均有显著性，并认为在肝细胞内TGFβ1通过活化受体样激酶5（ALK5)/Smad3通路使肝细胞分泌CTFG, 而IFN-γ可对抗CTGF发挥抗肝纤维化作用。因此可认为IFN-γ对HSC可抑制其活化增殖，对肝细胞有抑制凋亡与促生长作用，IFN-γ对抗TGFβ1抗肝纤维化作用通过TGFβ的信号传导而发挥作用。近认为IFN-γ与原发性胆汁性肝硬化、酒精性肝纤维化肝硬化发病有关。但有报道IFN-γ治疗丙肝致肝纤维化无效。HCV致肝损伤机制与HBV不同，后者比较肯定通过机体的免疫清除而发病。
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此也显示不同病因所致肝纤维化发病机制、治疗与预后均不同，甚至同种肝纤维化在发病的不同时期基因表达不同，治疗也应考虑不同的方法，因此肝纤维化的诊断与治疗均应考虑病因，病期（早、中、晚），病情（轻、中、重）与病理（炎病活动程度）不同而进行不同处理。若能阐明炎症→纤维化→癌之间的关系，人们诸多疾病防治均有益。
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【思考题】
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1．如何全面认识肝纤维化及其研究的重要性？
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2．试述TGF-β1在肝纤维化发病机理中正负两方面的作用。
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