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主要是导入MMPS和其活性调节因子的表达，抑制TIMPs的表达。Roderfeld等（2006）将MMP-9突变体插入腺病毒载体，在CCl4诱导大鼠肝纤维化模型中，能捕获TIMP-1减少血管压及周围的胶原沉积，肝脏羟脯氧酸含量及肝纤维化标志物mRNA都显著降低，在体内外研究均显示MMP-9突变体均能抑制HSC活化，促其凋亡。Hu等采用靶向TIMP2的SiRNA治疗CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，能抑制HSC活化促进ECM降解和促进肝细胞再生。
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（四）其他方面
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肝细胞生长因子与表皮生长因子均能诱导肝细胞增殖，促进肝细胞再生可能成为肝纤维化基因治疗的一种手段，但对前者诱导肝细胞癌生长有不同看法。另外IL-10、IFN-γ及α-黑色素细胞刺激素（α-MSH）均能抑制肝纤维化，而单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）可刺激纤维化发生，这些可通过诱节细胞因子抑制间质炎症反应也是肝纤维化基因治疗的重要策略。特别是MSH是一种神经内分泌激素，近发现α-MSH对动物生理活动发挥广泛的调节作用。包括对成纤维细胞。Wang等（2006年）用电穿孔方法诱导α-MSH表达质粒导入硫代乙酰胺大鼠肝细胞化模型，能降低TGFβ1、Ⅰ型胶原及细胞黏附分子的mRNA水平，减少α-SMA和环氧合酶-2的表达。增强MMP活性，使TIMPs失活，α-MSS能逆转肝纤维化。
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六、基因工程药物及疫苗
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通过基因工程生产真核细胞中微量、超微量合成的多肽或蛋白质，如激素、酶、神经递质、疫苗等，用于临床、科研、工农业、畜牧业乃至满足人们生活上的需要。血液中干扰素的含量只有105U/L, 用基因工程菌可生产含量为1011U/Lα-干扰素低营养培养物。利用转基因动物生产多肽药物，把动物看成是合成多肽药物的生物反应器，从而形成了合成活性多肽和蛋白质药物的新颖、廉价的技术路线。利用基因工程生产蛋白质有以下特点：①方法简便、可行；②适合大量获得目的基因的表达产物；③可实现常规无法解决的问题。
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抗肝纤维化基因工程药物——IFN-γ是目前认为最强的抗肝纤维化药物。IFN-γ是NK细胞和T淋巴细胞产生的细胞因子。上海克隆生物高科技有限公司生产的注射用重组人IFN-γ（克隆伽玛）于2001年11月通过SFDA新药审评中心评审，成为世界上第一个由政府批准的抗肝纤维化生物制品。
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浙江大学附属医院在IFN-γ抗肝纤维化的研究方面做了大量工作，体外实验、动物实验与临床研究均有甚多报道。国内外研究得最多的抗肝纤维化药物是IFN-γ。笔者等曾作过综述，从体外与动物实验肯定了其抗肝纤维化疗效。近翁红雷等报道原代培养HSC, 细胞生长2d和7d给予IFN-γ和（或）TGFβ刺激，Western blot观察细胞因子刺激后STATC信号转导和转录激活及Smad蛋白表达，免疫组化方法观察IFN-γ治疗前、后慢乙肝肝纤维化患者肝组织Smad蛋白表达变化。结论STAT途径是IFN-γ在HSC的信号传导途径IFN-γ可诱导产生HSC Smad7蛋白表达。并有剂量依赖关系。后者抑制TGFβ信号传导可能是IFN-γ抗肝纤维化可能机制之一。Saile等报道IFN-γ促进活化HSC凋亡，而IFN-α则不能。IFN-γ尚有抑制IFN-α的信号传导，不利于其对丙肝的治疗。
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经3种不同剂量的IFN-γ治疗3种不同动物模型肯定了IFN-γ抗肝纤维化的疗效，在1998年12月通过SFDA专家评审，批准进行临床研究，新药研究批件由浙江大学附属一院牵头，北京、上海、重庆、武汉、广州等医院参加协作，经2年共同研究，2002年获准IFN-γ作为抗肝纤维化治疗药物。临床研究治疗完成慢乙肝肝纤维化的289例，IFN-γ组153例，对照组136例，治疗结束时，接受2次肝活检83例（治疗组54例，对照组29例），疗效判断、肝活检以SSS计分下降5分显效，下降2分有效；非肝活检者以主要肝纤维化指标下降60％，症状消失，门脉主干内径宽达正常，脾脏缩小为显效；有效为肝纤维化指标下降40％，症状消失，门脉主干内径及肝缩小；未达显效与有效者为无效。总有效率为66％，显效2.2％，对照组14％（显效5.6％），肝活检组有效63％（显效27.8％），对照组24.1％（显效13.8％）。其中26例代偿期（早期）肝硬化者，5例肝小叶达正常。
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翁红雷等研究证实了IFN-γ不仅对HSC有作用而且对肝纤维化的肝细胞也有作用，慢乙肝纤维化患者经IFN-γ治疗9个月后，肝组织学免疫组化发现肝细胞的CTGF、Smad3下降，而Smad7增长，其差异均有显著性，并认为在肝细胞内TGFβ1通过活化受体样激酶5（ALK5)/Smad3通路使肝细胞分泌CTFG, 而IFN-γ可对抗CTGF发挥抗肝纤维化作用。因此可认为IFN-γ对HSC可抑制其活化增殖，对肝细胞有抑制凋亡与促生长作用，IFN-γ对抗TGFβ1抗肝纤维化作用通过TGFβ的信号传导而发挥作用。近认为IFN-γ与原发性胆汁性肝硬化、酒精性肝纤维化肝硬化发病有关。但有报道IFN-γ治疗丙肝致肝纤维化无效。HCV致肝损伤机制与HBV不同，后者比较肯定通过机体的免疫清除而发病。
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此也显示不同病因所致肝纤维化发病机制、治疗与预后均不同，甚至同种肝纤维化在发病的不同时期基因表达不同，治疗也应考虑不同的方法，因此肝纤维化的诊断与治疗均应考虑病因，病期（早、中、晚），病情（轻、中、重）与病理（炎病活动程度）不同而进行不同处理。若能阐明炎症→纤维化→癌之间的关系，人们诸多疾病防治均有益。
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【思考题】
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1．如何全面认识肝纤维化及其研究的重要性？
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2．试述TGF-β1在肝纤维化发病机理中正负两方面的作用。
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3．试述肝纤维化基因诊断与治疗的进展。
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参考文献
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