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（2）基因型 目前认为HEV至少有7个基因型，即缅甸株（1型），墨西哥株（2型），美国株和猪HEV（3型），新近从中国台湾和辽宁分离的中国株（4型），意大利株（5型），希腊－1株（6型），希腊－2株（7型），从中国台湾和广州分离的毒株可归为4型或8型。我国的大多数HEV分离株与缅甸株为同一基因型。
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HEV可在人胚肺二倍体细胞（2BS）和FRh K4细胞体外培养，用HEV cDNA探针斑点杂交法和免疫荧光法检测细胞培养物为HEV RNA和HEV抗原阳性；用培养细胞的提取液感染猕猴也获成功。用感染HEV的食蟹猴肝细胞体外培养，可见HEV在肝细胞内复制。但目前HEV尚不能大量体外细胞培养。
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除已知人类感染HEV外，近年来发现凡＞3周龄猪100％都可检测到抗-HEV抗体、HEV RNA等血清标志物，现已明确全球猪都存在HEV感染，其意义尚不明确，提示HEV有潜在的动物源性传播，是HEV感染又一个储存宿主，可能与人类感染有关。关于HEV疫苗的研究与评价，目前正处于研究当中的疫苗有NIH杆状病毒表达的疫苗，另还有NIH日本株状病毒表达的病毒样颗粒（VLPs）口服疫苗，但疗效还不确切。
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6．庚型肝炎病毒（hepatitis G virus/GBV-C)
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1995年，Simons等发现庚型肝炎病毒（hepatitis G virus, HGV)，最初曾认为该病毒是非甲—非戊型肝炎病原。但是，近年来的多数研究表明，HGV可能不致病，它不是严格意义上的肝炎病毒的一种。
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HGV/GBV-C和HCV同属黄病毒科，为单正链RNA病毒，其基因组全长9.1～9.4kb, 有一个连续的开放读码框架，编码一个长度约2870～2900个氨基酸的多聚前体蛋白。5’端和3’端均有一个较短的非编码区（UTR)。多聚前体蛋白的氨基端为结构区，羧基端为非结构区。结构区分为衣膜1（E1)和E2。与丙型肝炎病毒（HCV）不同之处是无核心区或核心区较短，仅编码79个氨基酸。非结构区分为NS2、NS3、NS4 A/B、NS5 A/B等区，分别编码蛋白酶、解旋酶和RNA依赖的RNA聚合酶（图9-6）。
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至今尚未观察到HGV的病毒颗粒。
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图9-6 HGV/GBC-C基因组结构（Simmonds, 2003)
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7．TTV（transfusion transmitted virus)
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（1）病毒学特征 TTV系无包膜的小型病毒，病毒颗粒大小约30～50nm，核壳内含有单链环状DNA, 基因组长度约3.9kb。病毒分类尚未定。
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（2）基因结构 TTV系由3852个核苷酸组成圆环状单链（负链）DNA, 为约1.2kb的非翻译区和约2.6kb的翻译区，翻译区中有长（ORF1)、短（ORF2）两种编码病毒蛋白的主要开放阅读框架（ORF)，部分 ORF相互交错重叠，TA278株 ORF1和 ORF2分别编码770与202个氨基酸。ORF1位于TTV基因组的第589～2898位核苷酸，编码构成核壳的结构蛋白。ORF2位于第107～712位核苷酸，编码病毒复制中所必需的非结构蛋白。
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（3）TTV基因组的变异和基因型 TTV虽为DNA病毒，但其基因变异发生率不亚于RNA病毒。目前的TTV株至少可分类出11种基因型（基因型1～11）。在人体内存在准种现象。
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目前较多文献认为，TTV不存在肝脏致病性。也有部分文献发现TTV有一定致病性。有关TTV在人群中的感染率，各研究报告差异也较大。TTV在各国及各种人群确切感染率及致病性均应进一步研究。
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总之，TTV在普通人群及肝病患者中存在高度感染率。G1型TTV与肝脏疾病有一定相关性。不同区域引物对TTV的检测有明显不同的检测结果，应根据TTV检出型别情况探讨TTV与疾病的关系。鉴于TTV在人群中高度感染，应对其传染途径及与人类其他疾病关系进一步研究。
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8．TMLV（TTV-liked mini virus, TLMV)
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2000年Takahashi等报告，应用TTV-DNA引物作PCR, 检测日本300份因抗-HCV阳性而未被使用的供血员血浆，结果10份TTV DNA滴度＞105拷贝/ml, 其中3份（分别为CBD231、279和203）血浆PCR产物的长度较预期为短（约1.2kb），称为扩增产物0。然后对此扩增产物进行测序，并设计新引物作反向PCR, 获得一个长约2.1kb DNA, 称为扩增产物1，再根据其序列设计引物作反向PCR, 获得约1.2kb DNA, 称为扩增产物2，经测序证明其与扩增产物0的序列相同。由扩增产物1和2序列推算，该病毒的全长DNA序列较TTV为短，分别为2860nt（CBD231株）、2856nt（BD279株）和2897nt（CBD203株），但较鸡贫血病毒（chicken anemia virus, CAV）长，认为是一种新病毒，称为TTV样微小病毒（TTV-like mini virus, TLMV)。
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TLMV与TTV和CAV相似，其基因组为负链DNA。其基因结构也与TTV和CAV相似，TLMV和CAV有3个开放读框（ORFs)，但TTV仅有2个 ORFs, 三者均有一个较长的 ORF1和较短的 ORF2，在 ORF1前端均与 ORF2部分重叠，虽然TLMV与TTV和CAV基因组全长不等，但均有一个含T-Ag功能区和GGGCAA重复序列的相对保守区。根据保守区的基因序列作基因发生树分析表明，TLMV更接近于TTV, 但与CAV距离较远。TLMV的 ORF1编码约660个氨基酸，因该蛋白具有若干N糖基化功能区，推测为糖蛋白，这与TTV和CAV相似。关于TLMV在人群中流行率及致病性的问题仍在研究中。
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Takahashi等认为，TTV、TLMV和CAV可能组成一个病毒科（或超级科），该科具有下列特点：①基因组为单链闭合环状DNA；②在ORF2上游非编码区具有保守的TATA盒子、T-Ag和Cap位点功能区；③存在ORF2编码的蛋白功能区；④ORF1编码一个糖蛋白，其氨基末端富含精氨酸。本病毒科很可能存在更多的成员，其非编码区的保守核苷酸序列对发现新成员可能有用。
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虽然目前从人类分离的本科病毒对人几乎不致病，但在其众多成员中，某些病毒可能致病。由于本科病毒的异源性较高，因此，在研究致病性时，必须按各组单个成员或同一小组内关系最亲近的成员进行分析。但最后不同新病毒的发现命名与研究，仍需要国际病毒命名委员会和其他专业机构来确定。
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9．SEN病毒
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2000年意大利学者Primi等从1例感染HIV的毒瘾者血清中分离到一种约3800个核苷酸的单链DNA病毒，以该患者姓名的第一个字母命名为SEN病毒（SENV)。该病毒有8个成员，分别命名为SENV-A~H。SENV属于TTV相关病毒的超级家族成员，为小的、无包膜的单链环状DNA病毒。对SENV、TLMV、TA278（3.852bp）及YONBANV的ORFs全序列分析比较发现，SENV的ORF1氨基酸残基为642～762个。N末端富含精氨酸／赖氨酸区相对保守，与TTV原型株、SANBAN、YONBAV和CAV相似。SENV的ORF1具有三个Rep蛋白基序，其中SENV-A、SENV-C及SENV-H的羧基端包含一个亮氨酸拉链结构。在不同人群中SENV流行率各异，在意大利健康献血员中流行率较低，但在经血传播疾病发病率高的人群中流行率较高。但其致病性问题尚未证实。目前一般将SENV视为TTV的一个分离株。
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【思考题】
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1．对于非A-E、HGV/GBV-C、TTV、TLMV和SEN-V性病毒性肝炎，请设计研究方案，以反向遗传学手段克隆、鉴定其嗜肝性肝炎病毒病原体。
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