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1701463196 【实验目的】
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1701463198 (1)学习神经组织固定的基本原理。
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1701463200 (2)初步掌握组织固定的基本技术。
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1701463202 【理论基础】
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1701463204 用固定剂将所需神经组织固定,是神经解剖学技术中常用的方法。经过固定的神经组织能较好地维持组织结构,尽量保持生前状态,使细胞的蛋白质、脂肪、糖等成分转变为不溶性物质,以保持原有状态。通过固定可使组织硬化,保持组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程中不易损坏。
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1701463206 因为甲醛水溶液渗透力强,固定均匀,对组织收缩较小,所以神经组织的固定多选用pH6~8醛类固定液。
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1701463208 【实验对象】
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1701463210 大鼠一只,雌雄不限,体重250g左右。
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1701463212 【实验用品】
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1701463214 实验手术器械1套,输液瓶2只,止水夹2只,100mL量筒1只,1mL注射器1只。
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1701463216 0.9%生理盐水(冲洗液),10%福尔马林液(固定液),含30%蔗糖的10%福尔马林液,10%水合氯醛。
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1701463218 【实验内容】
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1701463220 (1)将冲洗液、固定液分别装入输液瓶中,并排除输液管中气泡(先排固定液,再排冲洗液)。
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1701463222 (2)用10%水合氯醛麻醉动物,待动物麻醉后将其固定在方盘中。
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1701463224 (3)手术:⑴用直剪在大鼠剑突处横向剪开,并沿肋骨两侧向上打开胸腔;用止血钳将胸腔壁与动物嘴相夹固定。⑵迅速纵向打开心包膜,使心脏充分暴露;然后剪开左心室将冲洗液输液针头插入心脏主动脉(弓)中,并固定好针头。
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1701463226 (4)放开冲洗液输液管上的止水夹,开始灌流,同时剪开右心耳放血。
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1701463228 (5)待肝脏颜色变浅,流出的液体不见血色时,开始用固定液固定,直到动物僵硬为止。
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1701463230 (6)灌流结束取出所需脑组织放入含30%蔗糖的福尔马林液中进行后固定和保存,待以后切片用。
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1701463232 【说明及建议】
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1701463234 (1)冲洗以肝脏颜色变浅为好。
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1701463236 (2)固定以固定液分布全身,四肢僵硬为止。
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1701463238 (周茵)
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