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0.9%生理盐水(冲洗液),10%福尔马林液(固定液),含30%蔗糖的10%福尔马林液,10%水合氯醛。
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【实验内容】
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(1)将冲洗液、固定液分别装入输液瓶中,并排除输液管中气泡(先排固定液,再排冲洗液)。
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(2)用10%水合氯醛麻醉动物,待动物麻醉后将其固定在方盘中。
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(3)手术:⑴用直剪在大鼠剑突处横向剪开,并沿肋骨两侧向上打开胸腔;用止血钳将胸腔壁与动物嘴相夹固定。⑵迅速纵向打开心包膜,使心脏充分暴露;然后剪开左心室将冲洗液输液针头插入心脏主动脉(弓)中,并固定好针头。
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(4)放开冲洗液输液管上的止水夹,开始灌流,同时剪开右心耳放血。
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(5)待肝脏颜色变浅,流出的液体不见血色时,开始用固定液固定,直到动物僵硬为止。
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(6)灌流结束取出所需脑组织放入含30%蔗糖的福尔马林液中进行后固定和保存,待以后切片用。
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【说明及建议】
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(1)冲洗以肝脏颜色变浅为好。
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(2)固定以固定液分布全身,四肢僵硬为止。
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(周茵)
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现代生理心理学实验教程 实验5 脑组织切片的制作(二)
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——冰冻切片
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【实验目的】
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(1)学习使用切片机,初步掌握切片制作过程。
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(2)了解、辨别切片结构。
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【理论基础】
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冰冻切片在组织学检查中被广泛应用,原因在于:⑴固定后或未经固定的新鲜组织,不需要像石蜡切片或火棉胶切片那样经过长时间多级次的脱水及包埋过程即可进行冰冻切片,因而能很好地将组织内的脂类、酶类保存下来,观察神经组织内的某些细微结构也优于其他两种方法;⑵制作方法简单快捷。
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【实验用品】
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L-1800恒冷箱切片机(或半导体制冷切片机),C型切片刀,切片托盘,平皿,手术刀,小毛笔,载玻片,滤纸。
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包埋液,蛋白甘油黏片液。
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