打字猴:1.701463549e+09
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1701463550 (2)用镊子夹一干棉球将切口分开,暴露前囟,并用铅笔做标记。
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1701463552 (3)用移动滑尺标出头骨钻孔处位置,然后用丝锥在头骨上钻孔,注意勿过深。
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1701463554 (4)将电极固定于电极移动架上,依照坐标将电极尖端旋至LH部位。
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1701463556 (5)将牙托粉和自凝牙托水混合成略稀的糊状,与螺丝和电极一并固定于动物头骨上。待牙托粉成形凝固后,取下电极夹。将动物送回休养,1周后,继续进行实验。
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1701463558 6.电刺激LH
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1701463560 在进行电刺激前应使动物吃饱并摄取足够的水。
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1701463562 (1)刺激参数:电流50~100μA,时间2~5s。
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1701463564 (2)将恒流输出仪调整参数后与电极座连接好,刺激三次,每次间隔至少5min,观察并记录刺激后动物的摄食、饮水情况。
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1701463566 7.电解损毁LH
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1701463568 (1)将动物麻醉,进行双侧阳极损毁。恒流直流电源的阳极接在埋藏电极的插座上,阴极接在动物的背部皮肤上,以下列参数电解LH,脑组织的损伤范围直径约为1.5mm左右。刺激参数:电流1.0mA,时间5~10s(对照组动物不做此步骤)。
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1701463570 (2)损毁完毕后,在切口处撒少许消炎粉,然后将伤口缝合,每针间距约为3~5mm。
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1701463572 如果只做损毁不做电刺激步骤可直接使用单极电极。
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1701463574 8.水及食物的供给和行为观察
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1701463576 手术后要保证动物可自由获取水及食物。
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1701463578 由于实验周期的限制,本实验只能显示下丘脑LH区损毁后阶段1至阶段2的摄食及体重变化。鉴于在此期间动物一般不饮不食,为维持其生命,需每日腹腔注射5mL生理盐水。对照组动物应给予同样处理,以便于比较。
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1701463580 9.摄食量及体重变化的计算
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1701463582 每次放入食槽的块状鼠食需用天平称重。食槽下放一小盘接动物吃食时散落的食物。计算公式如下:
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1701463584 摄食量=放入食槽的食物总重量—食槽中剩余的食物重量—散落的食物重量
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1701463586 体重变化=损毁手术时的体重—灌流时的体重
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1701463588 10.组织学检查
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1701463590 电解损毁1周后,用第五章预实验中所学的技术对动物进行脑组织灌流、切片和染色,对照图谱以确定损毁位置是否正确。
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1701463592 11.说明及建议
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1701463594 可以根据实验安排,选作电刺激或损毁部分。
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1701463596 (苏彦捷)
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