1701463549
1701463550
（2）用镊子夹一干棉球将切口分开，暴露前囟，并用铅笔做标记。
1701463551
1701463552
（3）用移动滑尺标出头骨钻孔处位置，然后用丝锥在头骨上钻孔，注意勿过深。
1701463553
1701463554
（4）将电极固定于电极移动架上，依照坐标将电极尖端旋至LH部位。
1701463555
1701463556
（5）将牙托粉和自凝牙托水混合成略稀的糊状，与螺丝和电极一并固定于动物头骨上。待牙托粉成形凝固后，取下电极夹。将动物送回休养，1周后，继续进行实验。
1701463557
1701463558
6．电刺激LH
1701463559
1701463560
在进行电刺激前应使动物吃饱并摄取足够的水。
1701463561
1701463562
（1）刺激参数：电流50～100μA，时间2～5s。
1701463563
1701463564
（2）将恒流输出仪调整参数后与电极座连接好，刺激三次，每次间隔至少5min，观察并记录刺激后动物的摄食、饮水情况。
1701463565
1701463566
7．电解损毁LH
1701463567
1701463568
（1）将动物麻醉，进行双侧阳极损毁。恒流直流电源的阳极接在埋藏电极的插座上，阴极接在动物的背部皮肤上，以下列参数电解LH，脑组织的损伤范围直径约为1.5mm左右。刺激参数：电流1.0mA，时间5～10s（对照组动物不做此步骤）。
1701463569
1701463570
（2）损毁完毕后，在切口处撒少许消炎粉，然后将伤口缝合，每针间距约为3～5mm。
1701463571
1701463572
如果只做损毁不做电刺激步骤可直接使用单极电极。
1701463573
1701463574
8．水及食物的供给和行为观察
1701463575
1701463576
手术后要保证动物可自由获取水及食物。
1701463577
1701463578
由于实验周期的限制，本实验只能显示下丘脑LH区损毁后阶段1至阶段2的摄食及体重变化。鉴于在此期间动物一般不饮不食，为维持其生命，需每日腹腔注射5mL生理盐水。对照组动物应给予同样处理，以便于比较。
1701463579
1701463580
9．摄食量及体重变化的计算
1701463581
1701463582
每次放入食槽的块状鼠食需用天平称重。食槽下放一小盘接动物吃食时散落的食物。计算公式如下：
1701463583
1701463584
摄食量＝放入食槽的食物总重量—食槽中剩余的食物重量—散落的食物重量
1701463585
1701463586
体重变化＝损毁手术时的体重—灌流时的体重
1701463587
1701463588
10．组织学检查
1701463589
1701463590
电解损毁1周后，用第五章预实验中所学的技术对动物进行脑组织灌流、切片和染色，对照图谱以确定损毁位置是否正确。
1701463591
1701463592
11．说明及建议
1701463593
1701463594
可以根据实验安排，选作电刺激或损毁部分。
1701463595
1701463596
（苏彦捷）
1701463597
1701463598
[
上一页 ]
[ :1.701463549e+09 ]
[
下一页 ]