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在手术实验观察后给第三组雌鼠注射雌二醇1mL，每天注射一次，共注射三天。第一、二组每天注射等量的生理盐水。第四天第三组大鼠注射雌二醇后，接着注射黄体酮1mL，6小时后采用雌雄配对的方法进行性行为观察。观察内容同前，将结果记录下来和上次记录一起进行比较分析。
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在观察性行为前再检查一次各组大鼠的阴道分泌物，观察它们进入动情周期中的哪一期。
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【说明及建议】
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（1）用棉签取阴道分泌物后，立即涂片，干后镜下观察，棉签使用专一，不要混用。
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（2）上述观察的性行为内容，不一定每一次每个大鼠都出现。
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（3）去卵巢后，大白鼠阴道涂片可能不会马上停留于动情间期，如仍在其他时期则可继续饲养几天再观察。
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（肖健）
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现代生理心理学实验教程 实验9 剥夺睡眠情况下大鼠脑内5-HT
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和NE含量的变化
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【实验目的】
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通过本实验了解剥夺睡眠大鼠脑内5-羟色胺（5-hydroxy tryptamine,5-HT）和去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）含量的变化情况，并与正常睡眠周期的大鼠相比较；同时掌握用高效液相色谱检测某些神经递质的方法。
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【理论基础】
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睡眠的神经机制研究表明，导致慢波睡眠的中枢在中缝核，而与快波睡眠有直接关系的部位是蓝斑。这两个区域对于睡眠与觉醒的调节是通过不同的神经递质来实现的。
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中缝核区域的细胞主要产生5-HT这种神经递质。如果电损毁中缝核，脑内5-HT含量减少，此时，动物出现不眠状态，慢波睡眠明显减少。蓝斑区域的细胞主要产生NE。如同5-HT在慢波睡眠中起明显作用一样，NE在导致快波睡眠中起一种重要作用。如果损毁蓝斑核，使脑内NE含量明显下降，快波睡眠就要受到抑制或完全不产生。
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高效液相色谱（HPLC）是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次的交换过程，它借助溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附能力、离子交换或分子大小不同引起的排阻作用的差别对不同溶质进行分离。对5-HT和NE等神经递质的测定方法甚多，唯独高效液相色谱法快速、简便、灵敏，应用广泛，并可对多种化合物同时进行分离测定，是目前比较理想的方法。
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【实验对象】
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SD品系大鼠2只，1只剥夺睡眠，1只正常对照。
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【实验用品】
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（1）仪器：高效液相色谱仪（美国Waters公司生产，高压泵为Waters 590型，电检测器为Waters460型，积分仪为HP3394型，色谱柱为1L荣酚胺专用分析柱），高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂生产），超声波粉碎机。
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（2）主要试剂：5-HT与NE标准品（美国Sigma公司生产），B-8离子对试剂（天津化学试剂工厂），二正丁胺（北京朝阳西会化工厂，进口分装），无水乙酸钠（AR，北京化工厂），柠檬酸（GR，北京化工厂），0.1mol/L过氯酸内含0.3mmol/L Na2EDTA与0.5mmol/L Na2 SO3（GR，北京化工厂），100%甲醇（GR，北京化工厂），3,4-2羟基苄胺（3，4-dihydroxybenzylamine，DHBA，美国Sigma公司），乙二胺四乙酸二钠（EDTA，GR，北京化工厂）。
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（3）标准样品：由教师预先配制好，每微升（μL）中含NE，5-HT和DHBA各25×10-12g。
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（4）50mmol/L乙酸钠-柠檬酸缓冲液（流动相）：教师预先配制。无水乙酸钠4.10g，柠檬酸9.50g，EDTA（乙二胺四乙酸二钠）111.6g,100%甲醇20.0mL，B-8离子对试剂4.0mL，加蒸馏水定容至1000mL。
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