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(5)建立睡眠剥夺动物模型:将大白鼠放入条件反射箱内,箱底的铜栅可通电,由电子刺激器自动每隔5min通电一次,电压50V,电流1mA,24小时剥夺睡眠。
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【实验内容】
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1.制备组织样品
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将剥夺24小时睡眠的大鼠断头取脑,在冰水中迅速分离出皮质、中脑、脑桥和延髓4个脑区(图6-3)。称取10~30 mg脑组织,置于300μL预先冷却的0.1 mol/L过氯酸中,根据脑组织多少加入1~2滴内标物DHBA,超声波粉碎机匀浆,然后高速离心(15000 r/min)15分钟。
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图6-3 大鼠脑分区示意图
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2.进样分析
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取离心后上清液10μL进样,打开仪器。调整色谱条件为:流动相为50mmol/L乙酸钠柠檬酸缓冲液(pH3.5),流速1.0mL/min,玻璃工作电极,Ag/AgCl参比电极,检测池电压为+0.75V,DHBA为内标物,样品中每个组分用内标分析法进行定置,结果由HP3394积分仪计算并直接打印。
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3.对照组
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将正常饲养的对照组大鼠按照上述程序测定5-HT与NE。
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4.结果
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剥夺睡眠大鼠的中脑和脑桥两部分脑组织的5-HT含量比正常大鼠要高,NE要低。有研究表明,中脑和脑桥部分的网状结构对控制和维持觉醒状态是极其重要的。中缝核的前核细胞产生5-HT抑制黑质和蓝斑产生多巴胺和NE,引起慢波睡眠。如果剥夺睡眠,就会使中缝核分泌的5-HT积累起来,而NE因受抑制而含量减少。
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【说明及建议】
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(1)正式测定前需让高效液相色谱仪运转较长时间,这样仪器比较稳定,测出的结果比较好。
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(2)积分仪需根据实际情况调整灵敏度、增益等参数,以达到最佳的记录效果。
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(肖健)
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现代生理心理学实验教程 实验10 电刺激引起的大鼠的侵犯行为
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【实验目的】
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观察皮肤电刺激和脑电刺激引起的种内和种间的侵犯行为,以及动物对无生命对象所产生的攻击行为。
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【理论基础】
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动物世界不是和平的,种间种内经常发生残酷的争斗。攻击(aggression)一词有不同的含义,此处指的是一种情绪行为,即把它视为一种强烈的内在感情。按照攻击的外在反应,可将其分成几种不同的类型,如掠夺的、雄性之间的、恐惧产生的、领土的、母性的和手段的攻击行为等等。按其种属的不同,还可分为种内的(如大鼠攻击大鼠)和种间的(如大鼠攻击小鼠)攻击行为。引起攻击行为的方法甚多,适合于引起实验室攻击行为的方法之一是给予动物一种讨厌的刺激,如疼痛刺激。疼痛刺激可由电刺激产生,并可得出较为准确的行为效果,而且这种方法的刺激参数易于定量和控制,方便可行,适于实验室研究各种动物攻击行为。
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