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(2)本实验使用高压电源,应严格注意安全。通电前应仔细检查线路和开关,实验者的手亦应保持干燥。严格控制电击时间。
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(苏彦捷)
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现代生理心理学实验教程 实验22 躲避条件反射建成后大鼠血清内乙酰胆碱酯酶活性的测定
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【实验目的】
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本实验采用躲避条件反射建成后的不同时间,大鼠血清内乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化情况,看看它与学习记忆有何关系。
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【理论基础】
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许多研究表明,在学习过程中神经网络中发生的突触可塑性变化,无论是突触传递易化或是突触阻抑都是因为改变了神经递质的释放或利用率。乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)是与学习记忆关系密切的一种神经递质,有研究表明脑内Ach和乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)比率较高的大鼠品系,其学习能力强一些;相反,Ach和AchE比率比较低的大鼠,其学习迷津的能力就较差。老年人记忆力衰退与胆碱能系统功能密切相关。与青年人相比,老年人脑内胆碱乙酰化酶(CAT)的活力降低,而胆碱酯酶的活力升高。
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本实验利用乙酰胆碱酯酶能使乙酰胆碱水解,而未被水解的剩余乙酰胆碱可与碱性羟胺作用,生成乙酰羟胺,后者在酸性溶液中与铁离子作用形成棕色复合物,可用比色法加以测定,计算剩余Ach含量,从而推算出胆碱酯酶活力。其反应式如下:
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【实验对象】
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成年大鼠4只。
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【实验用品】
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条件反射箱,721分光光度计(上海第三分析仪器厂生产)。
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(1)乙酰胆碱基质缓冲液:
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A液:巴比妥钠1.03g,蒸馏水30mL,1mol/L盐酸6mL,碳酸钠0.53g,加热助溶,然后加生理盐水至50mL。
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B液:氯化乙酰胆碱910mg,或溴化乙酰胆碱1.13g,加生理盐水至10mL(注意:氯化乙酰胆碱在一般水溶液中易水解失效,因此必须在临用前配制,或以5%的NaH2PO4溶液配成0.1%左右的氯化乙酰胆碱贮存液,配好后用瓶装密封放入冰箱中贮存,药效可保持一年,临用前用生理盐水稀释至所需浓度。)
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C液:氯化镁0.42g,氯化钾20mg,生理盐水加至10mL。
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(2)碱性羟胺溶液:14%盐酸羟胺与14%氢氧化钠溶液按1∶1比例混合。
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(3)氯化铁溶液:氯化铁(FeCl3·6H2O)10g,以0.02mol/L盐酸溶解并加至1000mL。
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以上溶液事先都由教师配制好,实验前学生只需准确量取A液16mL,B液2mL,C液2mL混合即可。
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【实验内容】
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1.躲避条件反射的建立
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