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现代生理心理学实验教程 第五章 神经组织切片的制作
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实验3 观察大鼠脑组织大体结构
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——学习马利根厚片染色法
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【实验目的】
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利用马利根染色法可将大脑灰质与白质染成不同颜色的特点,观察区分灰、白质及灰质核团分布的位置,学会从冠状面、矢状面认识大脑内部结构。
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【理论基础】
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马利根大脑厚片染色法最早于1931年开始使用,由发明人Milligan的名字命名,经过反复实验和改造,现已较为成熟适用。
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厚切片是观察脑内部结构的方法之一。脑片厚度为1.1~2mm,甚至20mm或更厚。利用马利根染色法染色,可分别将灰质与白质染成不同的颜色,借以用肉眼观察区分灰质、白质以及灰质核团的分布位置。
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【实验对象】
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兔或大鼠脑组织标本一个。
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【实验用品】
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(1)常用手术器械一套,量杯,量筒,弯盘,竹夹,玻璃棒,温度计,电炉,刀片。
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(2)药品
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⑴固定液:10%福尔马林。配制方法:10mL的甲醛水溶液加入90mL的蒸馏水配制而成。
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⑵染液Ⅰ:石炭酸40g,硫酸铜5g,浓盐酸1.25~1.5mL,蒸馏水1000mL。
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⑶染液Ⅱ:1%三氯化铁500mL,加入0.2%冰醋酸。
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⑷显色液:1%亚铁氰化钾水溶液。
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⑸保存液:含有2%盐酸的10%福尔马林。
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⑹黏片液:10%~15%明胶水溶液。
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【实验内容】
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(1)剥取动物脑组织后用10%福尔马林固定。
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(2)切片:1~2mm厚。注意:⑴切片刀用热水清洗;⑵切记,不得来回拉刀,一刀切到底。
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(3)冲洗:流水冲洗1~2天,蒸馏水洗12小时(或水洗24小时,蒸馏水过夜)。
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