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现代生理心理学实验教程 实验5 脑组织切片的制作(二)
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——冰冻切片
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【实验目的】
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(1)学习使用切片机,初步掌握切片制作过程。
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(2)了解、辨别切片结构。
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【理论基础】
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冰冻切片在组织学检查中被广泛应用,原因在于:⑴固定后或未经固定的新鲜组织,不需要像石蜡切片或火棉胶切片那样经过长时间多级次的脱水及包埋过程即可进行冰冻切片,因而能很好地将组织内的脂类、酶类保存下来,观察神经组织内的某些细微结构也优于其他两种方法;⑵制作方法简单快捷。
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【实验用品】
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L-1800恒冷箱切片机(或半导体制冷切片机),C型切片刀,切片托盘,平皿,手术刀,小毛笔,载玻片,滤纸。
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包埋液,蛋白甘油黏片液。
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组织标本块(可利用实验4中制得的脑组织块)。
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【实验内容】
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1.切片
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(1)按要求开启切片机(切片机使用方法见附注1)。
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(2)将组织标本块放在平皿中修整后,置于标本台上,滴加包埋液,使之冷冻。
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(3)按要求装好刀具、防卷板等。
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(4)开启转轮的锁,即可开始切片。
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2.裱片
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(1)裱片前先在载玻片上涂少许黏片液,待用。
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(2)恒冷箱切片机因装有防卷板,可用载玻片直接从刀上取片。用涂过黏片液的载玻片轻轻靠近切片,利用载玻片与箱体内的温度差别,切片会慢慢吸附在载玻片上,如有气泡,用小毛笔轻轻压赶,即可将气泡排出,一张切片就裱好了。
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(3)如使用半导体制冷切片机,裱片操作程序如下:
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⑴用小毛笔将切片轻轻挑下,置入70%酒精溶液或水中;
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⑵将载玻片伸入水中慢慢托起切片,使切片平整地贴在载玻片上;
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⑶用毛笔排除气泡,用滤纸吸干切片周围水迹即可。
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3.收藏
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