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用于病毒感染的确诊的金标准试验。病毒分离可用组织培养,选择恰当细胞系进行接种,根据病毒增殖指标识别,以血清学方法进行鉴定;或行鸡胚和动物接种,分离病毒。相关项目:细胞培养和抗原检测组合检查、病毒核酸检测。
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[参考范围](各种标本)病毒培养阴性。
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[临床意义]阳性:可确诊病毒感染。
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[应用评价]标本要求:无菌采集。细胞培养法但因其操作复杂、技术要求高、实验周期长而无法进行快速检测,并且培养的敏感(阳性)率低及对标本采集、运送较高要求而限制了其临床应用。一般根据临床表现特点可以作出病毒性感染初步诊断,但确诊须依靠病毒分离和血清学检查。
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体液、血液和组织标本真菌β-D-葡聚糖检测(detection of fungalβ-D-glucan in body fluid, blood and tissue samples)
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是检查侵袭性真菌感染疾病(invasive fungal diseases,IFD)、特别是免疫损伤病人的试验项目。真菌D-葡聚糖(BG)是一种真菌广谱循环标志物,假丝酵母菌病及曲霉菌感染者,可在其体液、血液和组织中检测到,但不存在于细菌、病毒和人类细胞中。相关项目:体液、血液和组织标本真菌分离、培养和鉴定。
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[参考范围](体液、血液和组织)阴性。
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[临床意义]阳性:假丝酵母菌病、曲霉菌病(可用于早期诊断)。
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[应用评价]标本要求:无菌采集。BG 试验既能够作为高度怀疑侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)住院病人的初筛诊断方法,又能作为临床上IFI病人评价疗效指标。对真菌培养阳性病人进行检测,可以区分出定植和感染。与半乳-甘露聚糖(galactomannan, GM)试验联合使用可以提高对曲霉感染的诊断,对于肺孢菌肺炎感染也具有一定诊断参考价值。
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(三)体外抗微生物药物敏感性试验
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在体外,测定微生物对抗菌药物的敏感性,可为临床提供选用有效抗菌药物的信息,以控制感染;综合某地区某种属致病菌一定数量群体的药敏结果,可了解该地区致病菌的耐药现状,为临床经验用药提供依据;对新研发抗菌药物进行药敏分析,可评价其抗菌药效;分析医院感染流行株的药敏谱,可为单株(a single strain)是否流行提供依据。
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常规药物敏感定性试验(routine qualitative susceptibility test)
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世界卫生组织(WHO)推荐的临床常规药物敏感定性试验的基本方法是用纸片扩散法,又称Kirby-Bauer法(K-B法):是将含有一定量的抗菌药物纸片贴在已接种了测试菌的琼脂平板上,纸片中药物吸收琼脂水分后即溶解,并不断向纸片四周扩散,其浓度按梯度递减;在纸片药物抑菌浓度范围内的四周,被测试病原菌的生长就被抑制,形成无此病原菌生长的透明圈(即抑菌圈),测量药物纸片周围抑菌圆圈的直径大小,即能反映出此被测试菌对测定药物的敏感性,并与此药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关。相关项目:标本涂片染色显微镜细菌检查;细菌培养、分离与鉴定。
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[参考范围]量取琼脂平板抑菌圈直径,参照临床和实验室标准学会(CLSI)标准判断结果报告:敏感、中介或耐药。
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[临床意义]根据化验报告明确具体病原体对药物的敏感程度;有关药物敏感性试验的术语:①敏感(susceptible,S),表示测试菌可被测定药物常规剂量给药后达到的血药浓度所抑制或杀灭。②中介(intermediate,I),表示测试菌对常规剂量用药后体液或组织中的药物浓度反应性低于敏感菌株,而在测定药物浓集部位的体液(如尿液)、或使用高于正常药量(如β-内酰胺类)时,临床上使用此药有效;③耐药(resistant,R),表示测试菌不能被体内感染部位能达到的抗菌药物浓度所抑制。
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[应用评价]因确定药物敏感性试验的敏感限是以药代动力学中的血药浓度作为依据的,而组织中与其他体液的浓度不一定与血药浓度相同,故不同组织感染时,以上述敏感限来判断药物治疗效果可能与临床不完全相符,再者由于病人的免疫功能不同,临床治疗的效果也不同。
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常规药物敏感定量试验(routine quantitative susceptibility test)
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临床常规药敏定量试验常用的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC):即用测得某抗菌药物能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度。相关项目:涂片染色细菌显微镜标本检查;细菌培养、分离与鉴定。
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[参考范围]测得药物对试验菌最低抑菌浓度,参照临床和实验室标准学会(CLSI)标准判断结果报告:敏感、中介或耐药。
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[临床意义]根据化验报告明确具体病原体对药物的敏感程度;有关药物敏感性试验的术语:①敏感:MIC值≤敏感折点。②耐药:MIC值≥耐药折点。③中介:MIC值在敏感~耐药折点之间。测定细菌对抗菌药物的敏感性,为临床提供选用有效抗菌药物的信息,以控制感染;综合某地区某种属致病菌一定数量群体的药敏结果,可了解该地区致病菌的耐药现状,为临床经验用药提供依据。
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[应用评价]MIC测定是药敏试验的金标准方法,结果准确可靠。当临床必须严格监控所用药物剂量时,MIC的测定结果可帮助进行分析和判断;但须指出,本试验的结果报告只是对抗菌药物的临床疗效进行一种预测。
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支原体药敏试验(susceptibility testing of mycoplasma)
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是针对支原体进行的药物敏感性试验。相关项目:(试剂盒组合)支原体分离鉴定、计数。
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[参考范围]根据针对支原体的试验药物敏感度判断:敏感(S)、中度敏感(M)或耐药(R)。
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